3 Subproduse bogate în ulei de camelină PUFA îmbunătățesc funcțiile metabolice sistemice și ale celulelor splinei în

Afiliere INCDBNA-IBNA, Institutul Național de Cercetare și Dezvoltare pentru Biologie și Nutriția Animalelor, Balotești, România

Ionelia Taranu,
Mikhail Grass,
Gina Cecilia Pistol,
Monica Motiu,
Daniela E. Marin,
Nicoleta Lefter,
Mariana Ropota,
Mihaela Habeanu

Cifre

Abstract

Torturile cu ulei de Camelina rezultă după extragerea uleiului din planta Camelina sativa. În acest studiu, prăjiturile cu ulei de camelină au fost hrănite la porci de îngrășat timp de 33 de zile, iar efectul acesteia asupra performanței, a analiților biochimici din plasmă, a mediatorilor pro/antiinflamatori și a apărării detoxifiante antioxidante în splină a fost investigat în comparație cu făina de floarea-soarelui. 24 de porci TOPIG încrucișați au fost repartizați aleatoriu la unul dintre cele două tratamente dietetice experimentale care conțin fie 12% făină de floarea-soarelui (tratament 1-T1), fie 12,0% prăjituri cu ulei de camelină, bogate în acizi grași polinesaturați ω-3 (ω-3 PUFA) ( tratamentul 2-T2). Rezultatele nu au arătat niciun efect al dietei T2 (prăjituri cu camelină) asupra consumului de furaje, creșterii medii în greutate sau eficienței furajelor. Consumul de dietă cu camelină a dus la o scădere semnificativă a concentrației plasmatice de glucoză (18,47%), cu o tendință spre o scădere a colesterolului plasmatic. În splină, dieta T2 a modulat răspunsul imun celular prin scăderea expresiei proteinelor și genelor markerilor proinflamatori, interleukina 1-beta (IL-1β), factorul de necroză tumorală alfa (TNF-α), interleukina 6 (IL-6) și interleukina (IL-8) și ciclooxigenaza 2 (COX-2) în comparație cu dieta T1. În schimb, dieta T2 a crescut (P Tabelul 1. Compoziția și conținutul de nutrienți calculat în dietele experimentale (%).

2. Analiza acizilor grași dietetici

Probele de furaje au fost prelevate la începutul experimentului și au fost analizate pentru compoziția acizilor grași. Lipidele au fost extrase prin metanol-hexan (ASRO-SR EN ISO 15304/AC, 2005). Probele au fost analizate folosind un cromatograf de gaze Perkin Elmer (Clarus 500, SUA) echipat cu injector (temperatura 250 ° C), detector de ionizare a flăcării (temperatura 260 ° C) și coloană cromatografică capilară BPX70 pentru esteri metilici ai acizilor grași (60 m × 0,25 mm id × 0,20 µm, Agilent, fluxul coloanei a fost de 50 mL/min, iar raportul de divizare a fost de 1∶100). Programul de temperatură a fost după cum urmează: creșteți de la 180 ° C la 220 ° C la 5 ° C/min și mențineți timp de 7 min, apoi creșteți la 220 ° C la 5 ° C/min și mențineți timp de 10 min. Timpul total de analiză a fost de 29 min. Vârfurile au fost identificate prin compararea timpilor de retenție cu soluția individuală de acizi grași de referință individuală (37 Component FAMWE Mix metilat, SUPELCO, SUA și ulei de soia, SUPELCO, SUA) (Tabelul 2 și Tabelul 3).

3. Măsurarea parametrilor biochimici ai plasmei

Concentrația de glucoză, colesterol total, colesterol lipoproteic de înaltă densitate (colesterol HDL), trigliceride, proteine totale, uree, Ca, Mg, Fe și activitatea fosfatazei alcaline (ALKP), glutamat piruvat transaminază (TGP) și glutamat oxaloacetat transaminază (TGO) au fost determinate pe un analizor automat de chimie BS-130 (Bio-Medical Electronics Co., LTD, China), pe plasma de sânge colectată la sfârșitul experimentului și apoi centrifugate timp de 25 de minute la 3500 × g.

4. Măsurarea subseturilor totale de imunoglobulină plasmatică (IgG, IgA, IgM)

Concentrația totală a subseturilor de imunoglobulină (Ig) (G, A și M) a fost măsurată prin ELISA (Bethyl, Medist, Montgomery, TX, SUA) în plasma sanguină, după diluarea plasmatică, după cum urmează: 1∶4000 (IgA), 1 20120.000 (IgG) și 1∶10.000 (IgM), după cum sa raportat anterior [21], conform instrucțiunilor producătorului. Absorbanta a fost citita la 450 nm folosind un cititor de microplaci (Tecan Sunrise, Austria).

5. Măsurarea capacității antioxidante a splinei

Nivelul de antioxidanți în țesutul splinei porcilor hrăniți cu dietă de floarea-soarelui de control sau cu prăjituri cu ulei de camelină a fost măsurat cu setul de capacitate antioxidantă totală (TAC) (QuantiChrom - BioAssay Systems, SUA). Pe scurt, probele de țesut splenic înghețat (100 mg) au fost întrerupte și omogenizate prin utilizarea omogenizatorului Ultra-Turrax (IKA-Werke GmbH & Co. KG, Germania) și tampon de fosfat conținând IGEPAL 1%, deoxicolat de sodiu 0,5%, SDS 0,1% și complet Tablete de cocktail (fără EDTA) inhibitoare de protează. Omogenatele au fost păstrate timp de 30 de minute pe gheață și apoi centrifugate la 10.000 × g la 4 ° C timp de 10 minute. 20 µL de lizat de țesut splenic sau soluție standard Trolox plus 100 µL de reactiv de lucru au fost adăugați la microplaca cu 96 de godeuri, amestecate prin atingere și incubate la temperatura camerei timp de 10 minute, conform instrucțiunilor producătorului. Absorbția punctului final a fost citită la 570 nm folosind un cititor de microplăci (TECAN, Sunrise, Austria).

6. Măsurarea producției de oxid nitric de splină

Nivelul oxidului nitric (NO) în splina porcilor hrăniți cu dietă de floarea-soarelui de control sau cu uleiuri de camelină a fost măsurat pentru a determina sinteza NO prin testul Griess, așa cum s-a descris anterior [22]. După precipitarea proteinelor, 100 uL de supernatant au fost amestecate cu un volum egal de reactiv Griess (1% sulfanilamidă, 0,1% naftiletilendiamin dihidroclorură și 2,5% acid fosforic) și incubate la 37 ° C timp de 10 minute. Absorbanța nitritului a fost măsurată la 550 nm folosind un cititor de microplăci (TECAN, Sunrise, Austria) și o curbă standard NaNO2 variind de la 0 la 100 (M. Concentrația a fost calculată pe baza intervalului de NaNO2, exprimat ca µmol/L NO2 - .