Vasodilatația la factorul de creștere endotelial vascular în artera uterină a șobolanului gravid este

Abstract

Dovezile epidemiologice sugerează că dieta maternă și compoziția corpului pot fi factori cheie în legăturile dintre greutatea scăzută la naștere și bolile cardiovasculare, hipertensiunea și diabetul insulino-independent în viața adultă (1-3). Aceste studii privind populația sunt puternic susținute de studii pe animale. La șobolan, o dietă maternă cu conținut scăzut de proteine sau o subnutriție globală în timpul sarcinii este asociată cu greutatea redusă la naștere și creșterea tensiunii arteriale sau toleranța afectată a glucozei la descendenții adulți (4-9). Mecanismele care stau la baza acestui efect nu sunt cunoscute, dar elucidarea lor va fi importantă pentru viitoarele măsuri de sănătate publică care vizează îmbunătățirea nutriției femeilor în vârstă de reproducere.

Furnizarea de substanțe nutritive către unitatea fetoplacentară depinde parțial de fluxul sanguin uterin. Fluxul de sânge uterin este crescut în timpul sarcinii normale din cauza vasodilatației (10) și a remodelării vasculare și s-a dovedit a fi redus atunci când șobolanii însărcinați sunt hrăniți cu o dietă restrânsă la nivel global (11).

VEGF este un mitogen specific (12), care promovează vasodilatația și neovascularizarea, și a fost identificat în țesuturile fetale, în placentă și, de asemenea, în vasele de sânge adulte (13, 14). Vasodilatația ca răspuns la VEGF este mediată de producția de NO și PGI2 prin stimularea receptorilor endoteliali flt-1 și Flk-1/KDR (15). Recent, a fost raportat la șobolan că nivelurile de ARNm VEGF cresc în țesutul uterin în timpul sarcinii (16). La om, s-a demonstrat că concentrația plasmatică maternă a VEGF este crescută în timpul sarcinii (17, 18).

Prezentul studiu a fost conceput pentru a investiga ipoteza că o dietă maternă cu conținut scăzut de proteine afectează circulația uterină în timpul sarcinii printr-o modificare a răspunsului vasodilatator la VEGF. De asemenea, au fost efectuate experimente pentru a determina dacă vreun efect asupra răspunsului la VEGF a fost dependent de o reducere a producției de NO sau PGI2. Datele preliminare au arătat că eliberarea de NO indusă de VEGF este redusă în arterele uterine din grupul cu proteine scăzute (Brawley, Itoh și Clough, observație nepublicată). Prin urmare, în studiul de față ne-am concentrat asupra examinării efectului inhibării NO sintazei în arterele uterine izolate prin îndepărtarea componentei de prostaciclină a relaxării induse de VEGF folosind mai întâi INDO. Pentru a determina dacă vreun efect a fost limitat la artera uterină, răspunsul arterei mezenterice la VEGF a fost studiat și la aceleași animale.

METODE

Animale și protocoale dietetice.

Toate experimentările pe animale au fost efectuate în conformitate cu Regatul Unit. Home Office Animals (Proceduri științifice) Act 1986, iar acest studiu a fost aprobat prin procesul de revizuire etică. Au fost studiate douăzeci și unu de șobolani femele virgine Wistar (Harlan, Bicestor, Oxon, Marea Britanie). Șobolanii au fost împărțiți aleatoriu în grupuri martor și grupuri cu conținut scăzut de proteine. Înainte de sarcină au fost hrăniți cu chow de laborator standard (CRMX, Special Diets Services, Cambridge, Marea Britanie). Hrănirea dietelor sintetice a început în ziua concepției (d 0 de gestație), ceea ce a fost confirmat prin observarea dopurilor de material seminal pe podeaua cuștii de împerechere. Zece șobolani din grupul de control au fost hrăniți cu o dietă conținând 18% cazeină în greutate și 11 șobolani au fost hrăniți cu o dietă cu conținut scăzut de proteine care conțin 9% cazeină în greutate. Toate dietele conțineau 5 g/kg metionină (5). În plus, s-a inclus 0,5 g/kg sulfat de magneziu pentru a preveni deficiența de magneziu (Tabelul 1). Toți șobolanii au avut acces gratuit la alimente și apă și au fost adăpostiți individual în cuști într-o cameră cu un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore și menținută la 22 ° C. Animalele au fost ucise prin inhalarea CO2 la 18 sau 19 de gestație. Pentru fiecare așternut, cinci pui și placentele lor au fost luați la întâmplare și cântăriți după disecția vaselor.

Determinarea funcției vasculare.

Toate curbele doză-răspuns au fost efectuate cu adăugiri de concentrație crescândă la intervale de 2 minute, iar 20 de minute au fost permise între măsurători ale fiecărei curbe de răspuns. Toate medicamentele și substanțele chimice, cu excepția VEGF, au fost obținute de la Sigma Chemical Co. (Poole, Marea Britanie).

Analiza datelor.

Valorile sunt date ca medie ± SEM. Tensiunea a fost exprimată ca procent de constricție maximă la KPSS, pentru a corecta diferențele mici de diametru ale vasului. Relaxarea a fost exprimată ca procent din tensiunea inițială de preconstricție. Valorile maxime ale răspunsurilor PE și KCl au fost calculate prin analiza de regresie neliniară cu cele mai mici pătrate și s-a calculat pEC50 (Prism 3.0, Graph Pad Software Inc., San Diego, CA, S.U.A.), dacă este cazul. Aceste valori au fost comparate de Mann-Whitney U test (SPSS 9.0J, SPSS Inc., Chicago, IL, S.U.A.). Dacă calculul pEC50 nu a fost adecvat, curbele concentrație-răspuns au fost comparate prin măsurători repetate bidirecționale ANOVA (Prism 3.0, Graph Pad Software Inc.). Semnificația a fost acceptată la nivelul

REZULTATE

Date despre animale

Greutatea corporală maternă la 18 sau 19 de gestație, rata de creștere a greutății materne în timpul sarcinii și numărul făturilor nu au fost diferite între grupurile de cazeină de 18% și 9% (Tabelul 2). Mediile greutăților fetale și placentare de la fiecare așternut individual nu au fost diferite între cele două grupuri (Tabelul 2).