Utilizarea peptidelor NBD cu celule permeabile pentru suprimarea inflamației
Abstract
Recunoașterea agenților patogeni de către receptori imuni înnăscuti sau adaptivi duce la activarea celulelor care prezintă acești receptori - de exemplu, macrofage, celule dendritice și limfocite. Semnalul generat de receptorul ligandat este comunicat schimbărilor în expresia genelor, ducând la o expresie îmbunătățită a moleculelor efectoare, cum ar fi citokinele și moleculele de aderență. 1 Acest proces depinde de activarea diferiților factori de transcripție inductibili, printre care membrii familiei factorului de transcripție factor nuclear (NF) -κB joacă un rol critic conservat și evolutiv.
Calea NF - κB
figura 1 Prezentarea căilor clasice și alternative NF - κB (reimprimată cu permisiunea de la referința 5).
NF - κB în boală
Studiile efectuate în ultimele două decenii au contribuit la stabilirea NF - κB ca un regulator cheie al multor procese biologice. În general, însă, activitatea inductibilă a NF - κB este cea mai strâns legată de montarea răspunsurilor imune înnăscute și adaptative și ca factor antiapoptotic, prosurvival, care probabil ajută la prevenirea uciderii celulelor imune în timpul infecției. Activarea aberantă a NF - κB, prin urmare, în cea mai mare parte duce la boli care sunt o consecință a răspunsurilor inflamatorii neregulate sau a supraviețuirii. Vezi tabelul 1 1 pentru principalele boli umane de care a fost legat NF - κB.
Identificarea domeniului de legare NEMO al IKKα și IKKβ
Figura 2 Regiunea kinazelor IκB (IKK) este necesară pentru interacțiunea cu modulatorul esențial al factorului nuclear (NF) -κB (NEMO). (A) Mutanții de trunchiere ai IKK lipsiți de extremitatea COOH - terminal (1-733), regiunea fără serină (1-707), domeniul bogat în serină (1-662) și regiunea 1 (1-644) au fost utilizate pentru analiza pull - down de către GST - NEMO. Niciunul dintre mutanți nu a interacționat cu GST. (B) Peptidele NBD de tip sălbatic au inhibat interacțiunea IKKβ cu NEMO in vitro și au împiedicat formarea complexului IKK endogen în celulele HeLa. În schimb, peptidele mutante (MUT) în care W739 și W741 au fost substituite cu alanină au fost inactive. (C) Efectul peptidelor domeniului de legare NEMO (NBD) asupra activității NF - κB în celulele HeLa după stimularea factorului de necroză tumorală α (TNFα) (din referința 61).
Utilizarea peptidei NBD permeabile la celule pentru a inhiba inflamația la modelele animale
Capacitatea peptidei NBD permeabile la celule de a suprima activitatea NF - κB din celule ne-a determinat să ne întrebăm dacă administrarea acestei peptide la animale ar duce, de asemenea, la inhibarea activității NF - κB. În raportul nostru original care descrie peptida NBD, am demonstrat că administrarea topică a acestei peptide a fost capabilă să suprime edemul urechii indus de forbol 12 - miristat 13 - acetat (PMA), demonstrând astfel eficacitatea acestuia la animale. Pentru a stabili mai bine eficacitatea potențială a acestei peptide în suprimarea inflamației la modelele animale mai relevante pentru bolile umane, am utilizat două modele de șoarece de inflamație, unul folosind caragenan pentru a imita un răspuns inflamator acut și un model de artrită indusă de colagen (CIA) pentru a imita un boală inflamatorie cronică. În secțiunile următoare oferim scurte rezumate ale acestor studii publicate pentru a ilustra eficacitatea peptidei NBD ca medicament antiinflamator la animale. 62