Tilacoidele din plante verzi dietetice scad golirea gastrică și tranzitul intestinal, promovează schimbări în
Abstract
Tilacoidele din plante verzi cresc sățimea prin afectarea hormonilor apetitului, cum ar fi grelina, colecistokinina (CCK) și peptida-1 asemănătoare glucagonului (GLP-1). Obiectivul acestui studiu a fost de a investiga dacă tilacoidele afectează, de asemenea, pasajul gastrointestinal (GI) și compoziția microbiană. Pentru a analiza efectele asupra trecerii GI, 16 șobolani au fost hrăniți cu gavaj o dietă bogată în grăsimi (HFD) de control sau suplimentată cu tilacoid cu 30 de minute înainte de a primi albastru Evans. Alți 16 șobolani au fost hrăniți cu HFD martor sau HFD tilacoid timp de două săptămâni înainte de provocarea intragastrică cu Evans blue. Cantitatea de albastru Evans din stomac și distanța de migrație în intestine după 30 de minute au fost utilizate ca măsurare a golirii gastrice și a tranzitului intestinal. Acestea au fost reduse prin suplimentarea cu tilacoid în studiul acut și totuși nu în mod semnificativ, de asemenea, după studiul de dietă de două săptămâni.
Al doilea obiectiv al studiului a fost de a investiga dacă suplimentarea cu tilacoid afectează microbiota intestinală și cantitatea de grăsime fecală la voluntarii umani sănătoși ( = 34) primind tratamente cu tilacoid sau placebo timp de trei luni. Microbiota a fost analizată utilizând secvențierea genei 16S rARN și qPCR, iar grăsimea fecală a fost extrasă cu diclormetan. Numărul total de bacterii și, în special, Bacteriodes fragilis grup, au fost crescute prin tratamentul cu tilacoid versus placebo, în timp ce tilacoidele nu au cauzat steatoree. Suplimentarea alimentară cu tilacoizi afectează astfel sațietatea atât prin intermediul hormonilor apetitului, cât și prin plinătatea GI și afectează compoziția microbiană fără a provoca efecte adverse GI, cum ar fi steatoreea. Acest lucru sugerează tilacoidele ca un agent nou în prevenirea și tratamentul obezității.
fundal
Tilakoidele fac parte din cloroplastul din toate frunzele verzi, deoarece sunt locurile pentru fotosinteză. Tilakoidele constau din diverse proteine legate de membrană, galactolipide, fosfolipide și antioxidanți precum clorofila, carotenoidele, zeaxantina și luteina [6]. S-a constatat anterior că tilacoidele extrase din spanac prelungesc lipoliza [7], scad absorbția glucozei peste peretele intestinal și creează un strat suplimentar temporar care acoperă partea mucoasă a intestinului [8]. În studiile la animale, suplimentarea cu tilacoid are ca rezultat o cantitate scăzută de grăsime corporală [9] și o scădere a aportului de alimente [10, 11]. În studiile de intervenție la om, s-a demonstrat că tilacoidele promovează sațietatea afectând plinătatea subiectivă, foamea și nevoia de alimente specifice, precum și îmbunătățesc eliberarea hormonului supresor al apetitului colecistokinină (CCK), peptida-1 asemănătoare glucagonului (GLP) -1) și leptină și pentru a suprima hormonul foamei grelină [12-16]. De asemenea, au fost raportate efecte asupra homeostaziei glucozei și insulinei după mesele standardizate, precum și în starea de repaus alimentar [12, 13, 15]. Mai mult, suplimentarea cu tilacoid favorizează pierderea în greutate corporală la om; 6,3% în trei luni [12].
Scopul prezentului studiu a fost de a investiga modul în care suplimentarea cu tilacoid afectează golirea gastrică, tranzitul intestinal și concentrațiile plasmatice ale CCK, utilizând două modele de șobolani; una care măsoară efectele imediate ale unei diete bogate în tilacoizi cu grăsimi prin gavaj și una care măsoară efectele după două săptămâni de supliment de tilacoid în dietă. Al doilea obiectiv a fost de a măsura modificările compoziției microbiene la fecale, precum și cantitatea de grăsime fecală, după suplimentarea zilnică cu tilacoid de trei luni la femeile supraponderale.
Metode
Experimente pe animale
Studiu acut; HFD prin gavaj
Consum alimentar ad libitum de două săptămâni
În studiul de tratament de două săptămâni, șobolanii au fost împărțiți în două grupuri; unul care primește acces ad libitum la HFD tilacoid ( = 8) și unul care primește acces ad libitum pentru a controla HFD ( = 8) timp de 2 săptămâni. În ultima zi, șobolanii au fost ușor anesteziați cu fluotan și o doză intragastrică în bolus de albastru Evans a fost administrată prin gavaj. 30 de minute mai târziu șobolanii au fost profund anesteziați și s-a efectuat aceeași procedură descrisă pentru studiul acut.
Analize de golire gastrică și tranzit intestinal
Probele intestinale și stomacale au fost centrifugate la 3000 × g timp de 30 de minute la 4 ° C, după care 1 ml din fiecare probă a fost transferat în tuburile Eppendorf și centrifugat la 16.000 × g timp de 60 de minute la 4 ° C. 100 μL din fiecare probă au fost încărcate în cele din urmă pe o placă cu 96 de godeuri și absorbanta a fost citită la o lungime de undă de 565 nm (A565). Procentele de golire gastrică și migrația Evans au fost calculate folosind ecuațiile 1 și 2 [19].
Ecuația 1. Procentul de golire gastrică a fost calculat prin formula:
Ecuația 2. Procentul migrației Evans a fost calculat prin formula:
Experiment uman
Probele fecale au fost colectate de la 34 de femei supraponderale ( = 18 în grupul tilacoid, = 16 în grupul de control) care fuseseră înscriși într-un studiu de 12 săptămâni de dietă și tratament de intervenție descris anterior [12]. O băutură de afine, cu sau fără supliment de tilacoid, a fost ingerată în fiecare dimineață timp de 12 săptămâni. Băutura de afine conținea 50 ml supă de afine (Ekströms original, Procordia Food AB, Eslöv, Suedia) și 2,8 g ulei de rapiță (Zeta, Di Luca și Di Luca AB, Stockholm, Suedia). În băutura de afine tilacoidă s-au adăugat 5 g de Appetil (Greenleaf Medical, Stockholm, Suedia). Conținutul caloric a fost de 209 kJ/50 kcal în băutura tilacoidă și 188 kJ/45 kcal în băutura de control. Criteriile de excludere au fost diabetul, alergiile și intoleranța alimentară, sindromul intestinului iritabil, utilizarea recentă a antibioticelor (în termen de șase luni de la includere), precum și faptul că ați fost vegetariană, fumătoare, însărcinată sau ați urmat o dietă de slăbit în ultimele trei luni.
În timpul perioadei de intervenție de 12 săptămâni, subiecții au fost instruiți să consume trei mese pe zi și să nu aibă gustări între mese, precum și să efectueze 30 de minute de exerciții fizice intense în medie, în fiecare zi. În timpul intervenției de 12 săptămâni, toți subiecții au scăzut în greutatea corporală, iar grupul tilacoid a scăzut semnificativ mai mult în greutatea corporală și în nivelurile lipidelor din sânge. Mai multe detalii care descriu procesul uman, iar rezultatele pot fi găsite în studiul anterior [12].
În acest studiu, au fost incluse doar 34 din cele 36 de femei inițiale, din cauza neconformității cu predarea probelor fecale. Experimentul a fost realizat în conformitate cu liniile directoare stabilite în Declarația de la Helsinki și toate procedurile care implică subiecți umani au fost aprobate de Comitetul de Etică al Universității Lund (nr. 2006/361). Consimțământul informat scris și verbal a fost obținut de la toți participanții înainte de începerea experimentului.
Eșantioanele fecale au fost colectate de participanți în mediul lor de origine în termen de două zile înainte de a ajunge la clinică și introduse la -20 ° C direct după colectare. Participanții au primit tuburi sterile de 50 ml cu o lingură mică atașată în capac, special concepută pentru acest scop. La clinică, probele colectate au fost decongelate și împărțite în două; o parte a fost menținută la -80 ° C până când s-au făcut analize bacteriene și cealaltă parte a fost introdusă într-un recipient de sticlă deschis și lăsată să se usuce la 100 ° C timp de 48 de ore înainte de efectuarea analizei conținutului de grăsime.