Soarta Staphylococcus aureus rezistentă la meticilină (MRSA) în condiții acide simulate

Departamentul de Științe ale Agriculturii, Alimentației și Mediului (SAFE), Universitatea din Foggia, Foggia, Italia

Institutul de Cercetări în Știința Alimentelor, CIAL (CSIC-UAM), Madrid, Spania

Institutul Zoopropilactic Experimental din Apulia și Basilicata, Matera, Italia

Institutul Zoopropilactic Experimental din Apulia și Basilicata, Putignano, Italia

Institutul Zoopropilactic Experimental din Apulia și Basilicata, Matera, Italia

Departamentul de Științe ale Agriculturii, Alimentației și Mediului (SAFE), Universitatea din Foggia, Foggia, Italia

Corespondenţă

Giovanni Normanno, Departamentul de Științe ale Agriculturii, Alimentației și Mediului (SAFE), Via Napoli 25, Universitatea din Foggia, 71121, Foggia, Italia.

Departamentul de Științe ale Agriculturii, Alimentației și Mediului (SAFE), Universitatea din Foggia, Foggia, Italia

Institutul de Cercetări în Știința Alimentelor, CIAL (CSIC-UAM), Madrid, Spania

Institutul Zoopropilactic Experimental din Apulia și Basilicata, Matera, Italia

Institutul Zoopropilactic Experimental din Apulia și Basilicata, Putignano, Italia

Institutul Zoopropilactic Experimental din Apulia și Basilicata, Matera, Italia

Departamentul de Științe ale Agriculturii, Alimentației și Mediului (SAFE), Universitatea din Foggia, Foggia, Italia

Corespondenţă

Giovanni Normanno, Departamentul de Științe Agricole, Alimentație și Mediu (SIGUR), Via Napoli 25, Universitatea din Foggia, 71121, Foggia, Italia.

Abstract

O cantitate cunoscută (10 7 cfu/ml) de origine animală rezistentă la meticilină Staphylococcus aureus (MRSA) ST398/t011/V și de origine umană tulpinile MRSA ST1/t127/IVa au fost inoculate individual în ricotta mostre de brânză și hamburger. PH-ul fiecărei matrice alimentare a fost redus treptat de la 6,0 până la 2,0 într-o perioadă de aproximativ 2 ore, în condiții care simulează digestia mecanică a stomacului uman. Ulterior, tulpinile MRSA au fost recuperate utilizând un mediu de placare specific MRSA. Deși ambele tulpini au prezentat o anumită rezistență acidă, au prezentat răspunsuri diferite la valori scăzute ale pH-ului în timpul experimentului: ST398 a supraviețuit nevătămat în timpul experimentelor până la ultima etapă la pH 2, unde numărul de 6,4 cfu/g pentru hamburger și 7,5 jurnal cfu/g pentru ricotta s-au obținut teste de brânză. În schimb, populația ST1 nu mai era detectabilă la pH 3 în hamburger și la pH 2 în ricotta teste de brânză. Din câte știm, acesta este primul studiu care investighează capacitatea MRSA de a depăși condițiile acide ale stomacului uman și care adaugă noi dovezi care ar putea contribui la extinderea cunoștințelor științifice cu privire la semnificația MRSA în dezbaterea siguranței alimentare.

Repere

Studiul descrie pentru prima dată soarta MRSA umană și animală, inoculată în diferite matrice alimentare, în condiții acide simulate ale stomacului uman.
Studiul oferă informații despre supraviețuirea MRSA în condiții acide ale stomacului uman, care ar putea fi utile în scopuri de siguranță alimentară.
Cele două tulpini de MRSA utilizate în acest studiu arată comportamente diferite în condiții experimentale.

1. INTRODUCERE

Este larg recunoscut faptul că o aciditate gastrică normală poate oferi o apărare importantă a gazdei împotriva agenților patogeni ingerați prin uciderea acestor microorganisme, așa cum s-a demonstrat anterior pentru mai mulți bacili gram negativi și celule vegetative ale Clostridium difficile, Mycobacterium avium, precum și pentru agenții patogeni nosocomiali, cum ar fi Candida albicans, Rezistent la meticilină Staphylococcus aureus (MRSA), rezistent la vancomicină Enterococ spp. (VRE) și cu spectru extins - producător de β - lactamază Enterobacteriaceae (Bodmer, Miltner și Bermudez, 2000; Donskey, 2004; Rao, Jump, Pultz, Pultz și Donskey, 2006).

O serie de studii au examinat răspunsurile adaptive ale S. aureus expus la stres acid în alimentele fermentate (Bore, Langsrud, Langsrud, Rode și Holck, 2007; Rode și colab., 2010). Cu toate acestea, sunt disponibile puține informații cu privire la capacitatea condițiilor acide ale stomacului uman de a ucide MRSA ingerat. Scopul acestui studiu a fost de a evalua supraviețuirea a două tulpini MRSA incluse în două alimente de origine animală expuse mediului stomacului uman prin simularea condițiilor de acid gastric și a digestiei sale mecanice.

2 MATERIAL ȘI METODE

2.1 Pregătirea rezistentei la meticilină S. aureus (MRSA) inocul

O tulpină MRSA ST398/t011/V, anterior izolată din laptele de vacă crud, și o tulpină MRSA ST1/t127/IVa, izolată anterior din tampoane nazale umane (Parisi și colab., 2016), au fost suspendate individual în 5 ml de bulion BHI (pre-inoculum) și incubat la 37 ° C timp de 24 de ore. Cultura MRSA a fiecărei tulpini a fost preparată prin resuspendarea, pentru fiecare, a 20 pl din pre-inocul în 5 ml de bulion proaspăt de BHI incubat la 37 ° C timp de 24 de ore. Concentrația MRSA a fiecărui inocul utilizat în experimentul de aciditate gastrică simulată a fost de 5 ml × 107 cfu/ml conform standardului McFarland.

2.2 Pregătirea matricilor alimentare

Mediul alimentat a fost preparat așa cum a fost descris anterior de Barroso, Cueva, Peláez, Martínez - Cuesta și Requena (2015). Mediul conținea arabinogalactan (1 g/L), pectină din măr (2 g/L), xilan (1 g/L), amidon de cartofi (3 g/L), glucoză (0,4 g/L), extract de drojdie (3 g/L), peptonă (1 g/L), mucină (4 g/L) și L-cisteină (0,5 g/L). Odată ce pulberile au fost dizolvate, amestecul a fost apoi autoclavizat și pH-ul a fost ajustat până când a atins valoarea de 6,5.

Două alimente de origine animală, ricotta brânză și hamburger, au fost utilizate în experimente. Pentru a exclude părtinirea în rezultate, fiecare matrice alimentară a fost testată înainte de experiment pentru prezența S. aureus și MRSA utilizând protocolul descris de Parisi și colab. (2016).