Senzația de durere abdominală indusă de carcinomatoza peritoneală este însoțită de modificări ale
Masami Suzuki, Minoru Narita, Minami Hasegawa, Sadayoshi Furuta, Tomoyuki Kawamata, Maho Ashikawa, Kanako Miyano, Kazuyoshi Yanagihara, Fumiko Chiwaki, Takahiro Ochiya, Tsutomu Suzuki, Motohiro Matoba, Hiroki Sasaki; Senzația de durere abdominală indusă de carcinomatoza peritoneală este însoțită de modificări în expresia receptorilor de substanță P și μ-opioizi din măduva spinării la șoareci. Anestezie 2012; 117: 847-856 doi: https://doi.org/10.1097/ALN.0b013e31826a4ac8
Descărcați fișierul de citare:
Pacienții cu carcinomatoză peritoneală raportează adesea dureri abdominale, care sunt relativ refractare la morfină. S-a considerat că este necesar un nou model animal pentru investigarea mecanismului durerii abdominale pentru dezvoltarea tratamentelor optime pentru acest tip de durere.
Pentru a pregăti un model de carcinomatoză peritoneală, în cavitatea abdominală au fost implantate celule de cancer gastric cu semințe foarte peritoneale, 60As6. Modalitatea nociceptivă pentru comportamentul legat de durere a fost evaluată în termeni de comportament de sevraj ca răspuns la stimuli mecanici și comportament curbat. Probele de țesut de la ganglionii rădăcinii dorsale ale șoarecilor și măduva spinării au fost supuse imunohistochimiei și reacției în lanț în timp real a transcripției polimerazei.
Șoarecii cu diseminare peritoneală au arătat o hipersensibilitate semnificativă a abdomenului la stimularea mecanică și la un comportament spontan asociat durerii viscerale. A existat o creștere semnificativă a celulelor c-Fos-pozitive în măduva spinării la șoarecii purtători de tumori. Acei șoareci au prezentat o creștere remarcabilă a neuronilor substanței P-pozitivi în ganglionii rădăcinii dorsale (control vs. tumoră, 15,4 ± 1,1 vs. 24,2 ± 3,6, P
Atât reglarea în sus a substanței P, cât și reglarea în jos a receptorului μ-opioid observat în ganglionii rădăcinii dorsale pot fi, cel puțin parțial, responsabili de starea asemănătoare durerii abdominale asociate cu carcinomatoza peritoneală.
Ce știm deja despre acest subiect
Unii pacienți cu cancer au o tumoare răspândită pe tot peritoneul abdominal
Boala tumorilor peritoneale răspândite, carcinomatoza, poate fi dureroasă și refractară la terapiile analgezice convenționale
Ce ne spune acest articol că este nou
Anchetatorii au dezvoltat un model de șoarece de carcinomatoză
Studiile comportamentale arată că răspunsurile legate de durere sunt prezente și, ca și la pacienți, răspunsurile sunt rezistente la morfină
În viitor, pot fi studiate terapiile experimentale ale durerii
Durerea moderată sau severă asociată cu cancerul poate afecta în mod dramatic calitatea vieții și supraviețuirea pacienților și afectează 64% dintre cei cu cancer metastazat sau în stadiu avansat.1 Intensitatea percepută a acestei dureri depinde de tipul specific de cancer și de localizarea acestuia, precum și sensibilitatea fiecărui pacient la durere.2 Durerea asociată cu cancerul este, în general, tratată cu opioide, medicamente antiinflamatoare nesteroidiene, corticosteroizi, anestezice locale, antidepresive și anticonvulsivante, fie singure, fie în combinație. poate fi dificil de controlat durerea la unii pacienți cu cancer terminal. În consecință, sunt necesare tratamente mai eficiente. Înțelegerea noastră slabă a mecanismului durerii asociat cancerelor continuă să stea ca un obstacol major în calea descoperirii de analgezice noi pentru a răspunde acestei nevoi.
Materiale și metode
Toate experimentele au fost efectuate în conformitate cu orientările etice ale Asociației Internaționale pentru Studiul Durerii15 și au fost aprobate de Comitetul pentru Etica Experimentării pe Animale din Centrul Național al Cancerului (Tsukiji, Tokyo, Japonia). În cadrul experimentelor, s-au făcut eforturi pentru a reduce la minimum numărul de animale utilizate și suferința lor.
Animale
Au fost folosiți șoareci masculi C.B17/Icr-scid și șoareci Institute of Cancer Research cu o greutate de 22-25 g. Șoarecii au fost cumpărați de la CLEA Japonia (Tokyo, Japonia) și adăpostiți la o temperatură a camerei de 23 ± 1 ° C cu un ciclu de lumină - întuneric de 12 ore. Șoarecii au fost menținuți în condiții specifice fără patogeni și au furnizat hrană sterilă, apă și cuști.
Linii celulare și cultură
O linie celulară de cancer gastric scirros uman, HSC60, a fost stabilită așa cum s-a descris anterior. peretele unui șoarec scid. Pentru șase iterații, am recoltat celule tumorale ascitice și am efectuat inocularea ortotopică a acestor celule în șoareci pentru a stabili o linie celulară 60As6 extrem de metastatică. Această linie celulară a fost menținută în mediu RPMI1640 suplimentat cu ser de vițel fetal (10%), 100 U/ml penicilină G sodiu și 100 μg/ml sulfat de streptomicină sub o atmosferă de 5% dioxid de carbon și 95% aer la 37 ° C. Pentru a stabili transfectanții care au exprimat gena luciferazei, s-au folosit vectori plasmidici purtători ai genei luciferazei licurici, care au fost numiți pLuc/Neo și un reactiv de transfecție, LipofectAMINE 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA), conform recomandărilor producătorului. Geneticina (500 μg/ml; Invitrogen) a fost utilizată pentru a selecta transfectanții stabili, iar clonele transfectate au fost examinate pentru exprimarea genei luciferazei prin detectarea bioluminescenței utilizând un sistem IVIS (Xenogen, Alameda, CA). Clonele care exprimă gena luciferazei au fost denumite celule 60As6Luc.
Inocularea intraperitoneală a celulelor 60As6Luc
Densitatea celulelor 60As6Luc a fost ajustată la 1 × 106 celule per 1 ml soluție salină tamponată cu fosfat (PBS). În grupul experimental, suspensia celulară a fost injectată în cavitatea abdominală printr-un ac de calibru 26,5 introdus în abdomenul central. În grupul de control, PBS a fost injectat în cavitatea abdominală în loc de celule 60As6Luc.
Măsurarea creșterii tumorale utilizând imagistica cu luciferază
Pentru măsurarea creșterii tumorii, a fost utilizată imagistica cu luciferază a întregului corp cu un sistem de imagistică IVIS pentru a vizualiza celulele 60As6Luc sub un timp de integrare de 10 minute pentru achiziționarea imaginii, așa cum s-a descris anterior.18 Pe scurt, șoarecii au fost injectați intraperitoneal cu 15 mg D-luciferină sare de potasiu în 1 ml PBS folosind o seringă de calibru 26,5. Au fost apoi ținute anesteziate cu izofluran. Sarcina relativă a metastazelor tumorale a fost determinată utilizând software-ul Living Image (versiunea 2.50, Xenogen).