Proprietăți fitochimice și activități antioxidante ale extractelor din afine sălbatice și
Paulina Dróżdż
1 Laborator de chimie a mediului natural, Institutul de cercetare a pădurilor, Sękocin Stary, Polonia
Vaida Šėžienė
2 Departamentul de ecologie, Centrul de cercetare lituanian pentru agricultură și silvicultură, Distr. Kaunas, Lituania
Krystyna Pyrzynska
3 Departamentul de chimie, Universitatea din Varșovia, Pasteura 1, 02-093 Varșovia, Polonia
Date asociate
Abstract
Material suplimentar electronic
Versiunea online a acestui articol (10.1007/s11130-017-0640-3) conține materiale suplimentare, care sunt disponibile utilizatorilor autorizați.
Introducere
Consumul crescut de fructe și legume este recomandat în ghidurile dietetice din întreaga lume, deoarece acestea sunt bogate în substanțe nutritive și fitochimice. Fructele mici de fructe de pădure sunt consumate datorită culorii lor atractive și a gustului special și sunt considerate una dintre cele mai bogate surse de antioxidanți naturali [1, 2]. Dintre speciile de Vaccinium, afinele (Vaccinium myrtillus L.) și lingonberries (Vaccinium vitis-idaea) sunt populare în dieta umană, fie proaspete, fie sub forme procesate [3]. Fructele sunt colectate în mare parte din plante sălbatice care cresc pe terenuri accesibile publicului și le puteți cumpăra de pe piețele locale. Consumul lor a fost legat de prevenirea unor boli cronice și degenerative, iar cele mai semnificative beneficii pentru sănătate sunt atribuite compușilor fenolici și vitaminei C [4-6]. Aceste fructe de pădure conțin și alte substanțe bioactive, cum ar fi folatul, potasiul și fibrele solubile. Fructele Vaccinium myrtillus au fost utilizate în medicina tradițională internă (ca ceai sau lichior) pentru tratamentul tulburărilor tractului gastro-intestinal și ale diabetului.
Polifenoli precum flavonoizii și derivații acizilor hidroxicinamici și hidroxibenzoici, antocianine și procianidine se găsesc în concentrații deosebit de mari în diferite fructe de pădure [7-11]. Diferențele în profilurile fenolice din fructele de afine sau afine au fost legate de specie și soi, precum și de condițiile de creștere, maturitatea la recoltare și operațiunile de prelucrare. Compușii polifenolici prezintă o gamă largă de efecte biologice, inclusiv acțiuni antibacteriene, antiinflamatorii, antialergice și antitrombotice [12]. Aceste efecte benefice se datorează în principal activității lor antioxidante, deoarece pot acționa ca agenți reducători, donatori de hidrogen, stingători de oxigen singlet, precum și chelatori ai ionilor metalici, prevenind formarea catalizată de metal a radicalilor liberi [13, 14].
Scopul acestui studiu a fost de a evalua clasele majore de compuși polifenolici (fenolici totali, flavonoizi și antociani) din fructele de afine și lingonberry cultivate sălbatice în pădurea din regiunea centrală a Poloniei. Zona limitată a fost selectată pentru a avea condiții climatice uniforme, precum și altitudine. Activitățile antioxidante ale extractelor preparate din fructe de padure proaspete și uscate au fost, de asemenea, evaluate pentru capacitatea de eliminare a radicalilor 1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH) și puterea de reducere prin metoda capacității antioxidante de reducere cuprică (CUPRAC).
Material si metode
Eșantioane de produse chimice și fructe
1,1-difenil-2-picrilhidrazil (DPPH), reactiv fenol Folin-Ciocalteau, trolox, catehină și acid galic au fost cumpărate de la Sigma-Aldrich. Cianidin-3-glucozid a fost obținut de la Extrasynthese (Lyon, Franța). Toți ceilalți reactivi au fost de puritate analitică (Merck). Etanolul pentru extracția fenolilor a fost achiziționat de la Merck.
Fructe de afine sălbatice și lingonberries au fost colectate în aceleași locuri din pădurea de pini în septembrie 2016, în trei locații diferite din regiunea Mazovia. Coordonate pentru eșantion din Wyszków N 52 ° 41 ′, E 21 ° 29, din Ostrowia N 52 ° 49 ′, E 21 ° 45 ′ și din Chojnów N 52 ° 01 ′, E 21 ° 06 ′. Fructele au fost depozitate la -20 ° C, au fost decongelate la temperatura frigiderului (
4 ° C) și omogenizat cu blender pentru extracție și analiză. Uscarea fructelor a fost efectuată într-un uscător de laborator la 60 ° C timp de 24 de ore.
Pregătirea extraselor
Pentru extracția din fructe proaspete sau uscate, 700 mg din materialul omogenizat au fost agitate cu 25 ml de apă deionizată sau soluție de etanol-apă (60:40, v/v) timp de 20 de minute la 55 ° C. Apoi, extractele au fost filtrate prin hârtie de filtru Whatman nr. Pentru o probă dată (fructe proaspete sau uscate adecvate) s-au efectuat trei extracții independente folosind apă sau soluție hidroalcoolică.
Determinarea fenomenelor totale fenolice
Conținutul fenolic total al extractelor a fost evaluat folosind metoda reactivului fenol Folin-Ciocalteu (FC) [15]. 0,1 ml de extract s-au amestecat cu 0,1 ml de reactiv FC și 0,9 ml de apă. După 5 min, s-au adăugat 1 ml de Na2CO3 7% (greutate/volum) și 0,4 ml de apă. Extractele au fost amestecate și lăsate să stea timp de 30 de minute înainte de măsurarea absorbanței pe un spectrofotometru (PerkinElmer, UV - vizibil Lambda Bio 20) la 765 nm. Un amestec de apă și reactivi a fost folosit ca martor. Conținutul total fenolic a fost exprimat ca echivalenți de acid galic (GAE) în mg g -1 greutate proaspătă de fructe. Fiecare analiză a fost făcută în trei repetări.
Determinarea conținutului de flavonoizi
Conținutul total de flavonoizi a fost determinat utilizând o metodă spectrofotometrică bazată pe formarea complexelor lor cu Al (III) [16]. 1 mL dintr-o probă a fost amestecat cu 0,3 mL de NaNO2 (5%, greutate/volum) și după 5 min s-au adăugat 0,5 ml de AlCI3 (2%, greutate/volum). O probă a fost amestecată și șase minute mai târziu a fost neutralizată cu 0,5 ml de soluție de NaOH 1 mol/L. Amestecul a fost lăsat timp de 10 minute la temperatura camerei și apoi absorbanța a fost măsurată la 510 nm. Rezultatele au fost exprimate ca echivalent de catehină (CE) în μmol per gram greutate proaspătă de fructe. Absorbanta a fost masurata in trei replicari.
Determinarea antocianinelor monomerice
Conținutul total de antocianină monomerică a fost determinat folosind metoda diferențială a pH-ului [17]. 1 ml de extract a fost turnat în două baloane volumetrice separate. Una dintre ele a fost umplută cu soluție de KCl (pH 1) și a doua cu CH3COONa (pH 4,5) și aceste două soluții au fost lăsate timp de 30 de minute la temperatura camerei. În cele din urmă, absorbanța ambelor probe a fost înregistrată la lungimi de undă de 520 și 700 nm. Rezultatele au fost exprimate ca mg de cianidin-3-glucozidă (C3G) per gram de probă proaspătă. Fiecare analiză a fost făcută în trei repetări.