Permanganatul de potasiu - o prezentare generală Subiecte ScienceDirect
Permanganatul de potasiu duce la extragerea componentelor citoplasmatice, acesta fiind unul dintre motivele pentru care membranele apar atât de clar (Bradbury și Meek, 1960).
Termeni asociați:
- Amoniu
- Metcatinonă
- Mangan
- Leziuni toxice
- Proteină
- Amiloid
- Agent oxidant
- Toxicitate
- Mielom
Descărcați în format PDF
Despre această pagină
Microscopia electronică a sistemelor model
Hélio Roque, Claude Antony, în Methods in Cell Biology, 2010
4 Postfixare
Permanganatul de potasiu (Luft, 1956) a fost utilizat pe scară largă ca postfixativ în studiile de S. pombe. Păstrează bistratul cu membrană lipidică, care apare foarte contrastat în micrografiile electronice. Permanganatul de potasiu duce la extragerea componentelor citoplasmatice, acesta fiind unul dintre motivele pentru care membranele apar atât de clar (Bradbury și Meek, 1960). Permanganatul de potasiu a fost de obicei utilizat în drojdia de fisiune la concentrații de 1-3% în soluție apoasă. OsO4, un alt postfixativ obișnuit, este utilizat mai ales ca stabilizator de membrană (Hayat, 1981). Reacționează rapid cu lipidele și, într-o oarecare măsură, cu proteinele (Griffiths, 1993; Wright, 2000). OsO4 este utilizat în mod normal în soluție apoasă sau în tampon de cacodilat în concentrații cuprinse între 0,01% și 2,5%.
Centrifugați celulele la 6000 rpm timp de 5 minute și aruncați supernatantul. Se spală de 4–5 ori resuspendând în 10 ml de apă și se centrifugează din nou. Îndepărtați cu atenție supernatantul pentru a evita pierderea peletei de celule. În timpul centrifugării, pregătiți soluția de postfixare: 2% permanganat de potasiu în soluție apoasă (10 ml pe probă).
După ultima spălare, îndepărtați supernatantul și, împreună cu apa reziduală, transferați celula peletei într-un tub de sticlă cu fund rotund. Se adaugă 2 ml permanganat de potasiu 2% și se lasă la temperatura camerei timp de 5 minute.
Se peletează celulele la 6000 rpm, 5 min.
Înlocuiți soluția cu 6 ml de permanganat de potasiu 2% și incubați 45-60 min la temperatura camerei.
Se peletează celulele și se elimină fixativul. Spălați extensiv umplând tubul cu apă distilată și îndepărtând apa. Mutați ușor peleta cu o scobitoare de laborator și lăsați-o să sedimenteze înainte de a îndepărta apa. Repetați până când nu este vizibilă nicio culoare violet.
Dezinfectarea apei
Permanganat de potasiu
Permanganatul de potasiu este un agent oxidant puternic cu unele proprietăți dezinfectante. A fost utilizat pe scară largă înaintea hipocloritelor ca apă potabilă dezinfectantă. În unele părți ale lumii, este încă utilizat la scară mică în acest scop și, de asemenea, pentru spălarea fructelor și legumelor. Este cel mai frecvent utilizat ca soluție de 1-5% pentru dezinfecție și adesea vândut ca pachete de 1 g pentru a fi adăugat la 1 L de apă. La aceste concentrații, soluțiile sunt de culoare roz intens până la violet și pot pata suprafețele. Deși inactivarea bacteriană poate fi realizată cu concentrații moderate și timpi de contact, nu poate fi recomandată pentru utilizare pe teren, deoarece datele cantitative nu sunt disponibile pentru viruși sau chisturi protozoare.
Oxidare
3.8.4.2.3 Oxidări eterogene ale permanganatului
Permanganatul de potasiu adsorbit fie pe silice, fie pe alumină poate fi, de asemenea, utilizat pentru a cliva legături duble în condiții ușoare și cu randamente bune. Într-o procedură, alchena, dizolvată în benzen, este trecută printr-o coloană ambalată cu KMnO4 pe un suport de silicagel. 162 Reacția are loc rapid la temperatura camerei și este la fel de eficientă pentru scindarea tuturor tipurilor de legături duble, chiar și unele care sunt inerte față de alte metode tradiționale. 162
Tabelul 10. Oxidări permanganate asistate prin transfer de fază.
| KMnO4, Aliquat 336, benzen/H2O/acid acetic glacial | 80 | 155 |
| KMnO4 (s), diciclohexano-18-coroană-6, benzen | 86 | 157 |
| KMnO4, Aliquat 336, benzen/H2O/AcOH | 83 | 155 |
| KMnO4, Adogen 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 81 | 154 |
| KMnO4, Aliquat 336, benzen/H2O/AcOH | 90 | 155 |
| KMnO4, Adogen 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 84 | 154 |
| KMnO4, Adogen 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 88 | 158 |
| KMnO4, 18-coroană-6 | 102 | |
| KMnO4, Adogen 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | > 70 | 159 |
| KMnO4, Adogen 464, CH2Cl2/H2SO4/AcOH/H2O | 96 | 154 |
| KMnO4, eter de coroană, benzen | 97 | 160 |
| KMnO4, eter de coroană, benzen | ∼100 | 160 |
| KMnO4, MeO (CH2CH2O) nMe/CH2Cl2/AcOH/H2O | 82 | 161 |
| KMnO4, eter de coroană, benzen | 90 | 160 |
S-a constatat, de asemenea, că nu este necesar să se împacheteze oxidantul într-o coloană. 163 Alchena, dizolvată în diclormetan, poate fi clivată prin adăugarea la un balon care conține KMnO4 și silicagel care au fost amestecate mecanic. După agitarea sau agitarea amestecului pentru un timp adecvat, produsul poate fi izolat prin filtrare și evaporare a solventului. Alumina poate fi de asemenea utilizată la fel de bine ca suportul solid. 163 Exemple suplimentare sunt rezumate în Tabelul 11 .
ADN și aspecte ale biologiei moleculare
7.04.4.2 Permanganat de potasiu
Permanganatul de potasiu (KMnO 4) vizează, de asemenea, legătura dublă 5.6 a timinei, formând un timol diol (Ecuația (4)
), deși pot fi modificate și alte baze. 159 Deoarece interacțiunile de stivuire a bazelor prezente în ADN-B interferează cu accesibilitatea sitului țintă principal, KMnO4 este o sondă pentru timine nepereche 160.161 cea mai frecventă și alte structuri ADN modificate. 38.162.163.164 De exemplu, acest reactiv a fost utilizat pentru a demonstra formarea ADN monocatenar în complexul μ ADN - proteină în timpul transpunerii μ, 165 existența unor structuri stângaci adiacente unei regiuni de control genetic, 166 și adoptarea unei structuri neobișnuite de către o structură telomerică în condiții de stres superhelical și pH scăzut. 167 Hiperreactivitatea KMnO4 către purine într-o catena a unui ADN triplu catenar format de proteina RecA a permis, de asemenea, elucidarea structurii unui nou intermediar cu trei catene format în timpul recombinării omoloage. 168 KMnO4 a fost, de asemenea, utilizat pentru a cuantifica ADN-ul Z in vivo 39 și ca reacție T pentru secvențierea Maxam-Gilbert. 169