Optimizarea condițiilor de extracție și determinarea conținutului de purină la peștii marini în timpul anului

Tingting Li

1 Colegiul de Științe ale Vieții, Universitatea Dalian Minzu, Dalian, China

Likun Ren

2 Colegiul de Știință și Tehnologie Alimentară, Universitatea Bohai, Jinzhou, China

Dangfeng Wang

2 Colegiul de Știință și Tehnologie Alimentară, Universitatea Bohai, Jinzhou, China

Minjie Song

2 Colegiul de Știință și Tehnologie Alimentară, Universitatea Bohai, Jinzhou, China

Qiuying Li

2 Colegiul de Știință și Tehnologie Alimentară, Universitatea Bohai, Jinzhou, China

Jianrong Li

2 Colegiul de Știință și Tehnologie Alimentară, Universitatea Bohai, Jinzhou, China

Date asociate

b Randament de extracție (%) = (conținut de purină în probă (mg)/masa probei (kg)) × 100

Următoarele informații au fost furnizate cu privire la disponibilitatea datelor:

Măsurătorile brute sunt disponibile în fișierul S1.

Abstract

fundal

Guta este a doua cea mai frecventă boală metabolică care afectează sănătatea umană. Boala gutei este strâns legată de nivelul acidului uric, care este produsul final al metabolismului purinei umane. Mai mult, mâncarea este principala cale de ingestie externă de purină.

Metodă

O metodă simplă și care economisește timp a fost dezvoltată pentru a extrage purinele precum adenina, hipoxantina, guanina și xantina din peștii marini prin design cu un singur factor combinat cu Box - Behnken. Conținutul acestor purine din părțile comestibile și organele interne ale peștilor marini, precum și Scophthalmus maximus, au fost determinate prin cromatografie lichidă de înaltă performanță pentru a investiga relația dintre procesul de fierbere și conținutul de purină.

Rezultat

Metoda cu acid mixt a fost aleasă pentru extracția bazelor purinice și condițiile de extracție au fost după cum urmează: amestec acid 90,00% TFA/80,00% FA (v/v, 1: 1); temperatura de hidroliză 90,00 ° C; timp 10.00 min; raport lichid-solid 30: 1. Conținutul total de purină al părților comestibile (ochi, mușchi dorsali, mușchi abdominali și piele) a fost cel mai ridicat în Scophthalmus maximus, urmat de sphyraena, Sardinella, Trichiurus lepturus, Scomberomorus niphonius, Pleuronectiformes, somn de mare, Anguillidae și Rajiformes. Mai mult, fierberea a redus semnificativ conținutul de purină din peștele marin din cauza transferului purinelor în lichidul de gătit în timpul fierberii. Scophthalmus maximus, Sphyraena și Sardinella erau considerați ca pești marini cu conținut ridicat de purină, pe care ar trebui să-i mâncăm mai puțin. De asemenea, am confirmat că fierberea a transferat în mod semnificativ bazele purinice din pește în lichidul de gătit. Astfel, fierberea ar putea reduce conținutul de purină al peștilor, reducând astfel riscul de hiperuricemie și gută.

Introducere

Guta este un tip de artrită inflamatorie cauzată de depunerea cristalelor monosodice în țesuturi. A devenit a doua cea mai frecventă boală metabolică care afectează sănătatea umană (Goldberg și colab., 2017). Conform statisticilor, aproximativ 75 de milioane de oameni din China suferă acum de gută sau hiperuricemie. Aceste boli sunt puternic influențate de acidul uric, care este un metabolit al componentelor purinice ale ARN și ADN prezente în alimente. Nivelurile normale de urat seric la adulții sănătoși sunt sub 0,45 mmol/L la bărbați și sub 0,36 mmol/L la femei (Zhao și colab., 2005). Cu toate acestea, atunci când acidul uric din sânge depășește nivelurile normale, există un risc crescut de boli precum guta.

În această lucrare, este raportată o metodă simplă și fiabilă pentru extracția purinei. Mai mult, conținutul de purină (adenină, guanină, hipoxantină și xantină) din părțile comestibile a nouă pești marini a fost măsurat prin HPLC. În cele din urmă, efectul fierberii asupra conținutului de purină din părțile comestibile ale peștilor marini a fost investigat în contextul viabilității sale în scăderea riscului de atacuri de gută cauzate de dietă.

Material si metode

Substanțe chimice și reactivi

Standardele de purină (adenină, guanină, hipoxantină și xantină) au fost achiziționate de la Shanghai Aladdin Bio-Chem Technology Co., Ltd (Shanghai, China). Standardele au fost toate de calitate cromatografică cu puritate> 98%. Acidul acetic glacial de nivel cromatografic, alcoolul metilic, hidroxidul de tetrabutilamoniu și acidul trifluoroacetic (TFA) au fost, de asemenea, obținute de la Shanghai Aladdin Bio-Chem Technology Co., Ltd. Acidul formic analitic pur (FA) și acidul percloric (PCA) au fost cumpărate de la Tianjin Fengchuan Chemical Reagent Co., Ltd (Tianjin, China). Apa a fost purificată printr-un sistem Milli-Q (Millipore, Burlington, MA, SUA).

Eșantionare și pretratare

Colectie de mostre

Peștii marini vii (Scophthalmus maximus, Scomberomorus niphonius, Trichiurus lepturus, Pleuronectiformes, somn de mare, Sardinella, Sphyraena, Anguillidae și Rajiformes) au fost cumpărați de pe piața locală cu ridicata a fructelor de mare din Jinzhou, China, transportați la laborator unde au fost uciși apoi mușchii dorsali, mușchii abdominali, pielea, ochii și viscerele au fost îndepărtați pentru testare. Toate probele au fost tocate și depozitate la 0 ° C înainte de a continua.

Prelucrare preliminară

Părțile comestibile ale peștilor marini (mușchii dorsali, mușchii abdominali și pielea) au fost fierte separat în apă timp de 3, 6, 9, 12 și 15 minute și conținutul bazelor de purină din toate probele (părți comestibile și gătit) lichide) au fost determinate. Probele nefierte au fost utilizate ca grup de control. Au fost luate trei măsurători independente, iar media și abaterile standard au fost calculate.

Stabilirea metodei de extracție a purinei

Bazele de purină din probe au fost extrase conform metodei Piñeiro-Sotelo, López-Hernández & Simal-Lozano (2002), cu unele modificări. Mai întâi, s-au adăugat 200 mg de probă într-un tub de centrifugă (50 ml) cu 10 ml de acid și s-au încălzit la 90 ° C într-o baie de apă timp de 15 minute. Apoi, hidrolizatul acid a fost plasat într-un evaporator rotativ la 75 ° C pentru a îndepărta substanțele volatile, și apoi redizolvat în 10 ml de fază mobilă HPLC (apă-metanol-acid acetic glacial-20% hidroxid de tetrabutilamoniu (v/v = 879/100/15/6) În cele din urmă, proba a fost centrifugată la 8.000 g timp de 10 minute la 4 ° C și filtrată printr-un filtru de 0,22 μm înainte de analiză prin HPLC.