Extractele de licopen din diferite produse alimentare pe bază de roșii induc apoptoza la omul cultivat
Nathalia da Costa Pereira Soares
1 Program de absolvire a științei Alimentos, Institutul de Chimie, Universitatea Federală din Rio de Janeiro
Clara Lima Machado
2 Centrul de biochimie nutrițională, Laboratorul de alimente funcționale și biotehnologie, Universitatea Federală a Statului Rio de Janeiro
Bruno Boquimpani Trindade
2 Centrul de biochimie nutrițională, Laboratorul de alimente funcționale și biotehnologie, Universitatea Federală a Statului Rio de Janeiro
Ingridy Celestino do Canto Lima
3 Fundação Centro Universitário Estadual da Zona Oeste, Rio de Janeiro, Brazilia
4 Programul de biologie celulară, coordonarea Pesquisa, Institutul Național al Cancerului José Alencar Gomes da Silva, Rio de Janeiro, Brazilia
Etel Rodrigues Pereira Gimba
4 Programul de biologie celulară, coordonarea Pesquisa, Institutul Național al Cancerului José Alencar Gomes da Silva, Rio de Janeiro, Brazilia
5 Institutul de Umanități și Sănătate, Departamentul de Științe Naturale, Universidade Federal Fluminense, Rio de Janeiro, Brazilia
Anderson Junger Teodoro
2 Centrul de biochimie nutrițională, Laboratorul de alimente funcționale și biotehnologie, Universitatea Federală a Statului Rio de Janeiro
Christina Takiya
6 Institutul de Biofizică Carlos Chagas Filho, Universitatea Federală din Rio de Janeiro
Radovan Borojevic
7 Centrul de Medicină Regenerativă, Facultatea de Medicină din Petrópolis - FASE, Rio de Janeiro, Brazilia
Abstract
Introducere
Dovezile epidemiologice indică faptul că consumul ridicat de fructe și legume reduce riscul patologiilor cronice, cum ar fi cancerul și bolile cardiovasculare (Rissanen și colab., 2003; Jian și colab., 2005). De exemplu, consumul a patru sau cinci porții de produse din roșii pe săptămână a fost asociat cu un risc cu 40% mai mic de cancer de prostată în S.U.A. bărbați (Giovannucci și colab., 1995). Cei mai abundenți fitonutrienți din roșii sunt carotenoizii, licopenul fiind cel mai proeminent. Mecanismele prin care licopenul reduce riscul de cancer de prostată sunt încă neclare. S-a demonstrat că licopenul inhibă proliferarea în mai multe linii celulare tumorale (Chen și colab., 2001). Cu toate acestea, absorbția slabă a carotenoizilor de către rozătoarele de laborator a împiedicat sever utilizarea modelelor animale în studiile de prevenire a cancerului pentru a evalua eficacitatea și mecanismul de acțiune al licopenului (Lee și colab., 1999).
Mai mult de 80% din aportul licopen dietetic (un carotenoid fără activitate de provitamină A) provine din consumul de produse din roșii, inclusiv roșii crude, suc de roșii și sosuri de roșii (USDA, 2003). Numeroase studii au demonstrat o asociere inversă între aportul de licopen din dietă și riscul de cancer de prostată (Mills și colab., 1989; Giovannucci și colab., 2002). În special, consumul mai mare de produse din roșii, aportul estimat de licopen din dietă și concentrațiile circulante de licopen sunt invers asociate cu riscul de cancer de prostată în mai multe studii de cohortă umană (Wan și colab., 2014). Studiile de laborator au furnizat dovezi că roșiile și licopenul pot suprima leziunile oxidative, pot modula semnalizarea intracelulară, rezultând o proliferare redusă și pot spori sensibilitatea la apoptoză, printre alte mecanisme (Tan și colab., 2010). Unele rapoarte au fost sugerate că aportul de roșii sau licopen poate modula producția de testosteron, concentrațiile serice și metabolismul și poate avea un impact asupra expresiei genelor în celulele canceroase de prostată umane.
În special, licopenul gătit sau consumat în mediu uleios, cum ar fi pasta de roșii, sosul de roșii sau pizza, par a fi optime pentru absorbția eficientă a licopenului (Kirsh și colab., 2006). Prin urmare, eficacitatea sa biologică poate varia în funcție de sursa specifică de hrană și de metoda de preparare. Pentru a înțelege mai bine cum licopenul poate reduce riscul de cancer de prostată, în acest studiu am evaluat efectele putative ale a 4 tipuri de produse alimentare pe bază de roșii asupra comportamentului celulelor cancerului de prostată (PCa), în special asupra modulării viabilității celulare și a apoptozei.
Materiale și metode
Reactivi de cultură celulară
Mediul de cultură celulară Dulbecco (DMEM) și albumina serică bovină au fost obținute de la Sigma, iar serul bovin fetal (FBS) de la Laborclin (São Paulo, Brazilia). Flacoane de cultură celulară și răzuitoare de celule au fost obținute de la Nunc (Roskilde, Danemarca). Toate substanțele chimice au fost de calitate analitică.
Probe și extracție de licopen
Ketchup, sos de roșii, extract de roșii și pastă de roșii au fost cumpărate la supermarketul local (Rio de Janeiro, Brazilia). Extractele de licopen au fost obținute folosind etanol ca solvent (Nunes și Mercadante, 2004). Licopenul a fost identificat și cuantificat prin cromatografie lichidă de înaltă performanță. Extractele de licopen descrise mai sus au fost supuse procesului de liofilizare. Materialul obținut din acest proces a fost măcinat pentru a obține o „făină” și depozitat în sticle de chihlimbar la -18 ° C până la procedurile de testare în culturi de celule primare PCa.
Izolarea și caracterizarea culturilor de celule primare
Celulele PCa au fost obținute din fragmente de țesuturi de prostată obținute din cazuri de cancer supuse prostatectomiei radicale. Participanții și-au dat consimțământul scris pentru a participa la acest studiu după semnarea în Termenul de consimțământ stabilit. Procedurile au fost aprobate de Comitetul de Etică al Spitalului Universitar Clementino Fraga Filho, Universitatea Federală din Rio de Janeiro, Protocol-CAAE0029.0.197.000-05.