Expresia diferențială a miR-200c în celulele stem ale cancerului de sân

Dijun Wu

1 Departamentul de Radioterapie, Nantong First People’s Hospital, Nantong, Jiangsu 226000, China,

expresia

Ning Ji

1 Departamentul de Radioterapie, Nantong First People’s Hospital, Nantong, Jiangsu 226000, China,

Lei Zhang

1 Departamentul de Radioterapie, Nantong First People’s Hospital, Nantong, Jiangsu 226000, China,

Liang Zhang

2 Departamentul de Oncologie, Nantong First People’s Hospital, Nantong, Jiangsu 226000, China,

Abstract

Cancerul de sân a devenit cele mai populare tumori maligne la femei. Celulele stem ale cancerului de sân (BCSC) joacă un rol important în metastază și recurență. Studiul anterior a arătat o strânsă corelație între miR-200c și reglarea comportamentală a celulelor stem ale cancerului mamar. Acest studiu a avut ca scop investigarea expresiei diferențiale a miR-200c în celulele stem ale cancerului de sân și rolul său în reglarea proprietății formării tumorii. Testul microcipului ADN și qRT-PCR au analizat expresia diferențială a microARN-ului între BCSC și formarea non-tumorală a celulelor NTG. Testul genei raportor de bioinformatică și luciferază a determinat locul vizat al miR-200c. Imitatorul și inhibitorul MiR au fost transfectați pentru a modifica nivelul de expresie miR-200c, urmat de Western Blot pentru detectarea expresiei genei BMI1. Testul clonal celular a determinat proliferarea celulară, în timp ce xenogrefa tumorală a fost efectuată pentru a analiza potența formării tumorii. MiR-200c a fost reglementat în jos în BCSC comparativ cu celulele NTG (P Cuvinte cheie: Celule stem de cancer mamar, MicroRNA-200c, proliferarea celulelor, formarea tumorii

Introducere

Statisticile au arătat cancerul de sân ca fiind cele mai populare tumori maligne specifice femeilor și ocupă aproximativ 29% din toate cazurile de cancer feminin [1]. Chirurgia este în continuare strategia majoră de tratament, pe lângă chimioterapie și înlocuirea hormonilor, chimioterapia fiind abordarea majoră [2]. Reactivii obișnuiți de chimioterapie, inclusiv docetaxel și adriamicină, duc frecvent la rezistența la medicamente, ceea ce compromite grav eficacitatea tratamentului și crește sarcina pacientului [3,4]. Prin urmare, studiul mecanismului care stă la baza rezistenței medicamentoase la cancerul de sân are o importanță critică pentru îmbunătățirea eficacității tratamentului și scăderea sarcinii pacientului.

Celulele stem tumorale sunt un anumit subtip de celule din tumorile solide, cu potență de auto-reînnoire care determină eterogenitatea tumorilor [5]. Celulele stem tumorale au mai multe caracteristici similare cu cele ale celulelor stem normale. Studiile au arătat rolul important al celulelor stem tumorale în patologia multiplă și comportamentele celulare ale tumorilor maligne [6]. Auto-reînnoirea și potența de proliferare rapidă a celulelor stem tumorale sunt critice pentru întreținerea și reapariția tumorii. Între timp, mai multe mecanisme în interiorul celulelor stem tumorale sunt strâns corelate cu rezistența la medicamente după tratamentul de rutină al tumorii [7,8]. Prin urmare, studiul reglării comportamentale a celulelor stem tumorale maligne și mecanismul aferent sunt de o importanță critică pentru identificarea tratamentului eficient împotriva tumorilor maligne, inclusiv a cancerului de sân.

MiR-200c aparține familiei de microARN. Studiul anterior a arătat că microARN ar putea afecta comportamentele celulare multiple prin intermediul mecanismului de interferență ARN [9]. Analizând profilul expresional al microARN al celulelor tumorale maligne, s-a constatat că joacă un rol important în reglarea comportamentelor celulelor tumorale maligne [10]. Recent, un studiu a arătat roluri importante ale microARN-ului în reglarea celulelor tumorale maligne, deoarece miR-200c și miR-222 au avut niveluri de expresie anormale în liniile celulare ale cancerului de sân cu rezistență la medicamente [11,12]. Acest studiu a avut ca scop investigarea expresiei diferențiale a miR-200c în celulele stem ale cancerului de sân (BCSC) și mecanismul conex.

Materiale și metode

Materiale

BCSC și celule NTG cu formare non-tumorală celulă NTG, plus celule HEK293 au fost achiziționate de la Academia Medicală Chineză. Mediul de cultură DMEM, penicilina și streptomicina au fost achiziționate de la Gibco (SUA). Trusa de extracție ARN a fost achiziționată de la Qiagen (SUA). Un mediu DMEM îmbunătățit a fost achiziționat de la Invitrogen (SUA). Scanerul de microcip model GCS3000 și matricea de testare miRNA4.0 au fost achiziționate de la Affymetrix (SUA). Trusele de testare miVNA qRT-PCR MirVanat au fost achiziționate de la Ambion (SUA). PCR în timp real a fost achiziționat de la Bio-Rad (SUA).