Eficacitatea anti-aterosclerotică a olmesartan Journal of Human Hypertension

Abstract

Introducere

Pentru a clarifica mecanismul anti-aterosclerotic al antagonistului receptorului AT1 la primate, am investigat dacă un antagonist al receptorului AT1, olmesartanul, afectează funcția endotelială și markerii serici ai inflamației și factorii de creștere la maimuțele care au primit o dietă bogată în colesterol.

Metode

Protocol experimental

Maimuțe (Macaca fascicularis, n = 18) din ambele sexe au fost achiziționate de la Keari Co (Osaka, Japonia). Greutatea corporală a acestor maimuțe a variat între 4,3 și 6,2 kg. Toate maimuțele erau adăpostite la temperatura camerei (23-26 ° C) cu un ciclu de lumină - întuneric de 12 ore și aveau acces gratuit la alimente și apă. Șase maimuțe au fost hrănite cu o dietă normală timp de 6 luni (grup cu dietă normală). Doisprezece maimuțe, cărora li s-a administrat o dietă bogată în colesterol timp de 6 luni, au fost împărțite în mod egal într-un grup de control cu dietă bogată în colesterol și într-un grup cărora i s-a administrat olmesartan medoxomil (10 mg/kg/zi, pe cale orală). Dieta bogată în colesterol, care conținea 4% colesterol și 6% ulei de porumb, și dieta normală au fost achiziționate de la Oriental Yeast Co (Osaka).

La momentul inițial și la 1 lună, 3 luni și 6 luni, TA sistolică (SBP) și ritmul cardiac au fost monitorizate direct folosind un cateter (Suflo) (Termo, Tokyo, Japonia) cu un traductor la maimuțe sub anestezie cu clorhidrat de ketamină (10 ). mg/kg intramuscular). Probele de sânge au fost prelevate pentru a măsura nivelurile de lipide la momentul inițial și la 2 luni, 4 luni și 6 luni. La sfârșitul perioadei de tratament de 6 luni, maimuțele au fost anesteziate cu clorhidrat de ketamină (10 mg/kg intramuscular) și ucise prin exsanguinare. Aortele toracice descendente au fost îndepărtate rapid pentru analize histologice și biochimice.

Nivelurile de lipide din plasmă

Nivelurile colesterolului total, colesterolului cu lipoproteine cu densitate scăzută (LDL) și colesterolului cu lipoproteine cu densitate mare (HDL) au fost măsurate la momentul inițial și la 2 luni, 4 luni și 6 luni folosind un analizor automat de lipide (7250, Hitachi, Tokyo, Japonia ).

Analiza histologică

Au fost măsurate zonele leziunilor aterosclerotice ale aortei toracice. 5 Aorta toracică a fost fixată cu formalină tamponată. Țesutul fix a fost colorat cu ulei roșu O pentru vizualizarea prezenței depunerilor de lipide pe suprafața intimă. Aria aterosclerotică a fost calculată ca raportul dintre suprafața colorată cu ulei-roșu-O și suprafața totală cu un analizor de imagine (VM-30, Olympus, Tokyo). Imunomarcarea cu anticorp împotriva macrofagelor a fost utilizată pentru colorarea țesutului, folosind anticorpul HAM-56 (DAKO Corporation, Carpinteria, CA, SUA). 10

Răspunsul vascular

Arterele carotide au fost îndepărtate pentru experimentele de relaxare vasculară. Arterele au fost tăiate în benzi elicoidale, de 15 mm lungime și 2,0 mm lățime. Banda arterială a fost plasată pe un miograf sub o tensiune de repaus de 2,0 g. Mediul de scăldat a fost soluția Tyrode (137 mmol/l clorură de sodiu, 2,7 mmol/l clorură de potasiu, 1,8 mmol/l clorură de calciu, 1,1 mmol/l clorură de magneziu, 0,42 mmol/l dihidrogen fosfat de sodiu, 12 mmol/l bicarbonat de sodiu și 5,7 mmol/l glucoză, pH 7,4). Mediul a fost menținut la 37 ° C și a fost barbotat continuu cu 5% CO2 în oxigen. După perioada de echilibrare, artera a fost contractată cu noradrenalină (1 μmol/l) și apoi relaxată cu acetilcolină în funcție de doză (10 nmol/l până la 1 μmol/l). 11

Markeri serici

Kituri ELISA au fost utilizate pentru a determina nivelurile serice ale factorului de creștere transformant (TGF) -β1, factorului de stimulare a coloniilor de macrofage (M-CSF) și moleculei de aderență intracelulară (ICAM) -1 (R&D Systems, Minneapolis, MI, SUA).

analize statistice

Toate rezultatele sunt reprezentate ca medii ± eroare standard a mediei. Diferențele au fost considerate semnificative la

Rezultate

Conditii generale

Toate maimuțele par să fie sănătoase și nu au existat diferențe în ceea ce privește greutatea corporală, SBP sau ritmul cardiac între animalele din grupul cu dietă normală și cele din grupul cu dietă bogată în colesterol tratate cu olmesartan sau netratate, după o lună, 3 luni și 6 luni.

Nivelurile de lipide din plasmă

După 2 luni, 4 luni și 6 luni, nivelurile colesterolului total și LDL din grupul cu dietă bogată în colesterol au fost semnificativ mai mari decât cele din grupul cu dietă normală ( figura 1

journal

Analiza histologică

Figura 2 prezintă segmente ale aortei colorate cu ulei roșu O din cele trei grupuri de maimuțe. Zonele de leziuni aterosclerotice în aortele toracice nu au fost observate în grupul cu dieta normală. În grupul cu dietă bogată în colesterol, raportul dintre suprafața aterosclerotică și suprafața totală a fost calculat a fi de 72 ± 6%, în timp ce în grupul alimentat cu dietă bogată în colesterol plus tratament cu olmesartan, acest raport a fost redus semnificativ la 25 ± 14% ( Figura 2

Segmente de aortă colorate cu ulei roșu O de la maimuțe hrănite (A) dieta normala, () dietă bogată în colesterol și (c) dieta bogata in colesterol plus tratament cu olmesartan (10 mg/kg/zi).

Figura 3 prezintă fotografii tipice ale secțiunilor transversale aortice din grupurile cărora li s-a administrat dieta normală, dieta bogată în colesterol și dieta bogată în colesterol, plus tratamentul cu olmesartan. Zona intimă și raportul dintre zona intimă și zona mediană în grupul cu dietă bogată în colesterol au fost semnificativ reduse prin tratamentul cu olmesartan ( Figura 3

Secțiuni transversale tipice ale aortei toracice de la maimuțele hrănite (A) dieta normala, () dietă bogată în colesterol și (c) dieta bogata in colesterol plus tratament cu olmesartan (10 mg/kg/zi).

Răspunsul vascular

Acetilcolina (10-1000 nmol/l) a provocat o relaxare dependentă de endoteliu într-un mod de concentrație-răspuns în toate grupurile. Relaxarea dependentă de endoteliu în grupul cu dietă bogată în colesterol a fost semnificativ redusă comparativ cu cea din grupul cu dietă normală (

Discuţie

Proliferarea zonei intime a leziunilor aterosclerotice a fost în principal dependentă de acumularea de macrofage. Aceste constatări au fost observate și în leziunile aterosclerotice umane. 19.20 Keidar a raportat că A II induce modificarea LDL în LDL oxidat, care este preluat în macrofage pentru a încuraja formarea celulelor de spumă. 21 Angiotensina II induce, de asemenea, acumularea de macrofage prin inducerea proteinei chimiotratante monocite-1, despre care se știe că induce activarea și migrația monocitelor. 22 Mai mult, în acest studiu, olmesartanul a avut tendința de a reduce nivelurile serice de M-CSF și ICAM-1, ambele inducând, de asemenea, infiltrarea monocitelor în stratul intim și activarea macrofagelor, iar aceste acțiuni pot reduce, de asemenea, acumularea de macrofage. în stratul intim. Prin urmare, reducerea acumulării de macrofage în stratul intim de către olmesartan poate fi mecanismul predominant pentru suprimarea zonei intime.