Efectele unui extract de frunză etanolică de ortosifon stamineus proprietar standardizat asupra îmbunătățirii

Annie George

1 Biotropics Malaysia Berhad, Lot 21 Jalan U1/19, Section U1, Hicom-Glenmarie Industrial Park, 40150 Shah Alam, Selangor, Malaysia

Sasikala Chinnappan

1 Biotropics Malaysia Berhad, Lot 21 Jalan U1/19, Section U1, Hicom-Glenmarie Industrial Park, 40150 Shah Alam, Selangor, Malaysia

Yogendra Choudhary

2 Laboratoare Ethix Pharma, Karbala Road, Bilaspur 495001, Chhattisgarh, India

Vandana Kotak Choudhary

2 Laboratoare Ethix Pharma, Karbala Road, Bilaspur 495001, Chhattisgarh, India

Praveen Bommu

2 Laboratoare Ethix Pharma, Karbala Road, Bilaspur 495001, Chhattisgarh, India

Hoi Jin Wong

1 Biotropics Malaysia Berhad, Lot 21 Jalan U1/19, Section U1, Hicom-Glenmarie Industrial Park, 40150 Shah Alam, Selangor, Malaysia

Abstract

tabelul 1

Parametrii testului de legare a receptorului de adenozină A2A.

Adenozină A2A
SursăCelule HEK-293 recombinate umane
Ligand0,05 μM [3] CGS-21680
Vehicul1% DMSO
Timp/temp. De incubație. 90 minute la 25 ° C
Tampon de incubare50 mM Tris-HCI, pH 7,4, 10 mM MgCl 2, 1 mM EDTA, 2 U/mL adenozin Deaminază
Ligand nespecific50 μM NECA (5-N-etilcarboxamidă adenozină)
KD0,064 μM
B max⁡ 19 pmol/mg proteină
Legare specifică85%
Metoda de cuantificareLegarea radioligandului
Criterii de semnificație ≥50% din stimularea maximă
ReferințeCGS-21680

masa 2

Parametrii de testare funcționali ai receptorului adenosinei A2A.

Adenozină A2A adenilil ciclază
SursăCelule HEK-293 recombinate umane
Control 0,1 uM NECA
Vehicul0,40% DMSO
Timp/temp. De incubație.10 minute la 37 ° C
Tampon de incubareSoluție de sare echilibrată Hank (HBSS) modificată pH 7,4
Metoda de cuantificare Cuantificarea HTRF a acumulării AMPc
Criterii semnificative pentru agonistCreșterea ≥50% a AMPc în raport cu răspunsul NECA
Criterii semnificative pentru antagonistInhibarea ≥50% a creșterii AMPc indusă de NECA

Tabelul 3

Parametrul testului funcțional al receptorului de adenozină A1.

Adenozină A1
SursăWistar rat vas deferens
Control 0,3 μM CHA (N6-ciclohexiladenozină)
Vehicul0,10% DMSO
Timp/temp. De incubație.5 minute la 32 ° C
Tampon de incubareKREBS pH 7,4
Metoda de cuantificare Izometric (modificări gram)
Criterii semnificative pentru agonistReducerea ≥50% a zvâcnirii neurogene față de 0,3 μM răspuns CHA
Criterii semnificative pentru antagonistInhibare ≥50% a relaxării induse de CHA 0,3 μM