DETERMINAREA STATUTULUI SECRETORULUI

I. TESTA SALIVA

PRINCIPIU

Aproximativ 80% din populație are gena secretor (Se). Acești oameni secretă substanțe grupe sanguine solubile în apă în saliva și alte fluide ale corpului. Grupul A secretă o substanță și o cantitate mică de H, grupul B secretă substanța B (și H), grupul O secretă numai substanța H și grupul AB secretă A, B și o cantitate mică de H.

Pentru a determina dacă o persoană este secretară, principiul Inhibarea aglutinării este utilizat, în cazul în care prezența aglutinării înseamnă un test negativ și nici o aglutinare nu este interpretată ca un rezultat pozitiv.

Partea I - Neutralizarea anticorpilor:

Saliva se amestecă cu antiserul comercial (Anti-A, Anti-B sau Anti-H) și se lasă să se incubeze scurt. Dacă pacientul este secretor, antigenele solubile din grupa sanguină din salivă vor reacționa și neutraliza anticorpii din antiserul comercial. Cu toate acestea, este necesar să se dilueze antiserul comercial astfel încât titrul anticorpului său să se potrivească mai bine cu nivelul de antigen din salivă.

Partea II - Inhibiție de aglutinare:

Atunci când RBC-urile comerciale ale grupului sanguin adecvat sunt apoi adăugate la amestecul de testare, nu ar trebui să existe niciun anticorp liber care să le aglutineze dacă pacientul este secretor, deoarece anticorpii au reacționat deja cu antigenele grupului sanguin din salivă. Reacția va fi negativă pentru aglutinare, dar este interpretată ca pozitivă pentru statutul de secretor.

Dacă pacientul este nesecretor, nu vor exista antigene ale grupelor sanguine în salivă; anticorpii din antiser nu vor fi neutralizați și vor fi liberi să reacționeze atunci când se adaugă celulele testate. Prin urmare, aglutinarea este un test negativ pentru statutul de secretor.

REACTIVI, ECHIPAMENTE ȘI PRODUSE

• Curățați tubul pentru a colecta saliva
• Eprubetă Pyrex de 16 x 100 mm
• aruncați pipetele
• baie de apă clocotită
• Tuburi de 12 x 75 mm
• stilou
• Reactiv Anti-A, Anti-B sau Anti-H, diluat pentru a da o reacție 2+
• Celule A1 reactive, celule B sau celule O (celule de screening)
• serofugă
• vizualizator de aglutinare luminat

PROCEDURĂ

1. Se colectează 2 până la 3 ml de salivă într-un tub curat de 16 x 100 mm. Folosiți ceară de parafină sau curățați benzi de cauciuc pentru a stimula secrețiile - nu utilizați gumă.
2. Se pune într-o baie de apă clocotită timp de 10 minute. Aceasta inactivează enzimele care altfel ar putea distruge substanțele grupului sanguin.
3. Se lasă să se răcească scurt, apoi se transferă într-un tub de 12 x 75 mm.
4. Centrifugați cel puțin 5 minute.
5. Etichetați trei eprubete de 12 x 75 mm:
   

• UN TEST
• B TEST
• H TEST

1. Etichetați încă trei tuburi:

• UN CONTROL
• B CONTROL
• H CONTROL
  (Acestea sunt controale de diluare pentru a se asigura că anti-serul nu a fost diluat dincolo de capacitatea sa de aglutinare).

1. Adăugați o picătură din antiserul diluat corespunzător în fiecare tub:

• o picătură diluează anti-A până la testul A și controlul A.
• o picătură diluează anti-B la testul B și controlul B.
• o picătură anti-H la testul H și controlul H.

1. La fiecare tub TEST, adăugați o picătură de salivă limpede.
2. În fiecare tub CONTROL, adăugați o picătură de soluție salină.
3. Se amestecă și se incubează la temperatura camerei 10 minute.
4. Adăugați o picătură de celule roșii reactive corespunzătoare în fiecare tub:

---