Ateroscleroza indusă de dietă experimentală la papagalii Quaker (Myiopsitta monachus) - H

Informații despre articol

H. Beaufrère, Științe clinice veterinare, LSU-Școala de Medicină Veterinară, Skip Bertman Drive, Baton Rouge 70808, LA, SUA. E-mail: [e-mail protejat]

Abstract

Similar oamenilor, păsările au o susceptibilitate ridicată la ateroscleroză și prezintă probabil cea mai mare prevalență și severitate a leziunilor aterosclerotice la animalele vertebrate în condiții de captivitate standard. 4.6 Modelele aviare nonpsittacine au fost utilizate pe scară largă pentru investigațiile experimentale ale leziunilor aterosclerotice și ale complicațiilor fiziologice asociate acestora la specii precum porumbelul White Carneau (Columba livia domestica), Prepeliță japoneză (Coturnix japonica), și pui (Gallus gallus domesticus). 38,40,41,47

Alte modele animale de ateroscleroză implică în principal specii de mamifere, cum ar fi șoareci, șobolani, hamsteri, iepuri, porci, cobai, câini și primate neumane. 40,47 Deși împărtășesc fiziologie lipidică similară și sunt mai aproape de oameni decât păsările, modelele de mamifere (cu excepția primatelor) rareori dezvoltă leziuni spontane avansate în circumstanțe normale și atunci când sunt hrăniți cu o dietă standard. Prin urmare, rezultatele obținute din experimente folosind animale consangvinizate și modificate genetic nu pot fi ușor traduse în leziuni spontane la aceeași specie și la oameni.

Aici, raportăm inducția dietetică experimentală a leziunilor aterosclerotice avansate la papagalii Quaker (Myiopsitta monachus), o mică specie de psittacină susceptibilă la ateroscleroză spontană.

Materiale și metode

Proiectare experimentală

Tabelul 1. Analiza nutrițională a dietelor aterogene și de control utilizate într-un experiment privind ateroscleroza indusă de dietă la papagalii Quaker (% greutate uscată).

Colectarea și analiza probelor

O probă de sânge de 1 ml a fost obținută lunar de la fiecare pasăre din vena jugulară dreaptă și plasată în tuburi heparinizate (Microtainer; BD, Franklin Lakes, NJ). Pentru analize biochimice, sângele a fost centrifugat timp de 10 minute la 1000 × g, iar plasma a fost recoltată și depozitată la –80 ° C până la analiză. Probele au fost utilizate pentru a măsura volumul celulelor ambalate, profilul biochimiei plasmatice aviare (rotor Avian/Reptile, Abaxis VetScan; Abaxis, Union City, CA), trigliceride, colesterol total și lipoproteine cu densitate înaltă (HDL) (Ortho Vitros 250 Chemistry Analyzer, Rochester, NY). Concentrațiile de lipoproteine cu densitate foarte mică (VLDL) și lipoproteine cu densitate mică (LDL) au fost obținute folosind formula Friedewald. 13 O probă de sânge mai mare (3 ml) a fost obținută sub anestezie anterioară până la eutanasie. Activitatea proteinei de transfer a colesteril esterului plasmatic (CETP) a fost măsurată utilizând o analiză comercială conform instrucțiunilor producătorului (ab65383; Abcam, Cambridge, Marea Britanie) și o hemoleucogramă completă efectuată utilizând tehnica Leukopette. 11

Aorta ascendentă și arterele brahiocefalice și pulmonare au fost colectate în decurs de 15 minute de eutanasie, iar secțiunile au fost fixate în 10% formalină neutră tamponată pentru histopatologie și 2% paraformaldehidă și 1,25% glutaraldehidă într-un tampon de cacodilat 0,1 M pentru transmiterea microscopiei electronice (TEM) . Inima și ficatul au fost, de asemenea, colectate și fixate în 10% formalină tamponată neutră. Secțiuni proaspete suplimentare de artere și ficat au fost depozitate la –80 ° C pentru măsurarea colesterolului. Sexul a fost determinat la necropsie. Țesuturile fixate pe formalină au fost procesate în mod obișnuit în parafină. Secțiuni de cinci micrometri au fost tăiate și colorate cu hematoxilină și eozină, von Kossa pentru sărurile de calciu și tricromul lui Masson pentru colagen. Secțiunile congelate de formalină ale arterelor au fost, de asemenea, colorate cu roșu ulei O (ORO) pentru lipide. Țesuturile arteriale fixate pentru microscopia electronică au fost prelucrate, secționate și colorate folosind tehnici standard descrise anterior pentru probele de arteră psittacină. 8 În plus, secțiunile groase de 0,5 μm obținute din blocurile utilizate pentru secțiunile TEM au fost colorate cu albastru de toluidină. Secțiunile TEM au fost montate pe rețele de cupru acoperite cu colodion, colorate cu citrat de plumb Reynolds și au fost realizate cu un microscop electronic cu transmisie JEM-1011 (JEOL, Tokyo, Japonia).

Tipurile de leziuni aterosclerotice au fost clasificate în tipurile I-V în conformitate cu un sistem de clasificare publicat la papagali care reflectă clasificarea AHA. 8 Inima și ficatul au fost evaluate pe secțiuni histopatologice și s-au evaluat, de asemenea, aproximativ 15 până la 20 de artere coronare intramyocardice per inimă de aproximativ 40 până la 250 μm în diametru. Colesterolul total a fost măsurat în probe arteriale proaspete folosind un test comercial conform instrucțiunilor producătorului (ab65359; Abcam). Leziunile au fost, de asemenea, comparate calitativ cu leziunile spontane la 16 papagali Quaker de companie (interval de vârstă, 2-16,5 ani; sex: 6 bărbați, 3 femele, 7 necunoscuți) obținute de la un laborator de patologie veterinară (Zoo/Exotic Pathology Service, Sacramento, CA).

Analize statistice

Conținutul de colesterol hepatic și activitatea plasmatică CETP între grupuri au fost comparate folosind un test Kruskal-Wallis. Măsurile repetate de-a lungul timpului au fost analizate utilizând modele mixte liniare cu papagali ca variabilă aleatorie și tratament, timp și termeni polinomiali ca variabile fixe atunci când este cazul. Conținutul de colesterol arterial a fost analizat în mod similar, dar cu timpul și artera ca efecte fixe. Eterogenitatea variației și dependența dintre observații au fost modelate utilizând funcții de varianță și structuri de corelație serială, atunci când este cazul. Modelele concurente au fost evaluate pe baza criteriului informației Akaike, iar presupunerile modelului au fost evaluate pe parcele reziduale și cuantile. Comparații post-hoc parametrice și nonparametrice au fost efectuate cu o ajustare Tukey. Corelațiile dintre tipurile de leziuni din arterele aortei și brahiocefalice și colesterolul plasmatic la eutanasie sau conținutul de colesterol arterial au fost evaluate utilizând un coeficient de corelație Kendall τ. Corelațiile dintre colesterolul plasmatic la eutanasie și concentrațiile colesterolului arterial și hepatic au fost evaluate utilizând un coeficient de corelație Spearman. A 32