Relația dintre dimensiunea adipocitelor Omental și subcutanată cu boala metabolică la obezitate severă

Grup de cercetare a obezității de afiliere, Centrul de educație și cercetare, Spitalul Universitar St Vincent, Dublin, Irlanda

Departamentul de afiliere pentru endocrinologie, Spitalul Christchurch, Christchurch, Noua Zeelandă

Grup de cercetare a obezității de afiliere, Centrul de educație și cercetare, Spitalul Universitar St Vincent, Dublin, Irlanda

Departamentul de afiliere pentru patologie, Spitalul Universitar St Vincent și Spitalul St Columcille, Dublin, Irlanda

Departamentul de Chirurgie pentru Afiliere, Spitalul Universitar St Vincent și Spitalul St Columcille, Dublin, Irlanda

Unitatea de transplant hepatic de afiliere, Spitalul Universitar St Vincent, Dublin, Irlanda

Școala de afiliere de biochimie și imunologie, Trinity College, Dublin, Irlanda

Grup de cercetare pentru obezitate, centru de educație și cercetare, Spitalul Universității St Vincent, Dublin, Irlanda, Departamentul de Endocrinologie, Spitalul Universitar St Vincent și Spitalul St Columcille, Dublin, Irlanda

Jean O'Connell,
Lydia Lynch,
Tom J. Cawood,
Anna Kwasnik,
Niamh Nolan,
Justin Geoghegan,
Aiden McCormick,
Cliona O'Farrelly,
Donal O'Shea

Cifre

Abstract

Obiectiv

Mai multe studii au raportat existența unui subgrup de indivizi obezi cu profiluri metabolice normale. Rămâne neclar ce factori sunt responsabili pentru acest fenomen. Am propus că dimensiunea adipocitelor ar putea fi un factor cheie în protecția persoanelor obeze sănătoase din punct de vedere metabolic (MHO) de efectele adverse ale obezității.

Subiecte

Treizeci și cinci de pacienți supuși unei intervenții chirurgicale bariatrice au fost clasificați ca MHO (n = 15) sau obezi nesănătoși din punct de vedere metabolic (MUO, n = 20) conform punctelor limită adaptate din definiția Federației Internaționale de Diabet a sindromului metabolic. Indicele de masă corporală median (IMC) a fost de 48 (interval 40-71).

Rezultate

A existat o corelație moderată între dimensiunea adipocitelor omentale și dimensiunea adipocitelor subcutanate (r = 0,59, p 40, categoria de obezitate cu cea mai rapidă creștere [19]. Prin urmare, scopul acestui studiu a fost de a determina dacă dimensiunea adipocitelor este unul dintre factorii asociați cu fenotipul MHO în obezitate severă. Am investigat, de asemenea, relația dintre mărimea adipocitelor și gradul de NAFLD la acești subiecți.

Metode

Declarație de etică

Comitetul de Etică al Spitalului Universitar St Vincent a aprobat acest studiu. Consimțământul informat scris a fost obținut de la fiecare participant înainte de începerea oricăror activități de cercetare.

Subiecte

Am studiat 48 de pacienți consecutivi, cu obezitate severă supuși unei intervenții chirurgicale bariatrice. Toți pacienții participau la serviciul de control al greutății timp de cel puțin 1 an înainte de operație. Au fost cântărite lunar în acest timp. Pacienții au fost excluși din studiu dacă au avut o pierdere semnificativă în greutate în ultimele 6 luni (n = 4) sau dacă luau medicamente care ar putea afecta parametrii metabolici și/sau hepatici (n = 9). Am obținut probe de sânge și țesut adipos omental de la restul de 35 de subiecți. Nouăsprezece dintre cei 35 de subiecți au consimțit la prelevarea de probe de țesut adipos subcutanat. În ceea ce privește vârsta, IMC și parametrii metabolici, nu a existat nicio diferență semnificativă între grupul care a consimțit la biopsie și cei care nu. Vârsta medie a fost de 42 ± 7 ani, greutatea medie a fost de 150 kg (intervalul 103-240), iar IMC mediu a fost de 48 kgm -2 (intervalul 40-71). Au fost 10 bărbați și 25 de femei. Cincisprezece pacienți au fost clasificați ca obezi sănătoși din punct de vedere metabolic, pe baza profilului lor metabolic, după cum este detaliat mai jos. Șase din restul de 20 de pacienți nesănătoși aveau diabet de tip 2 (DM2).

Definirea subiecților obezi sănătoși din punct de vedere metabolic

Subiecții obezi metabolici sănătoși (MHO) nu au avut antecedente de boli cardiovasculare, respiratorii sau metabolice. Nu se foloseau niciun medicament antihipertensiv sau hipoglicemiant pentru scăderea lipidelor. Examenul clinic nu a fost remarcabil, iar starea tiroidiană a fost normală. Nivelul glucozei la jeun a fost ≤5,6 mmol/L, tensiunea arterială a fost ≤135/85, iar raportul colesterol TGL/HDL a fost ≤1,65 (bărbați) sau ≤1,32 (femei). Aceste puncte limită au fost adaptate din definiția consensului mondial al Federației Internaționale a Diabetului a sindromului metabolic, 2006. A fost utilizat raportul concentrației plasmatice a trigliceridelor/lipoproteinei cu densitate ridicată, deoarece s-a demonstrat că oferă un mijloc simplu de identificare a insulinei rezistente., pacienții dislipidemici care sunt susceptibili să aibă un risc crescut de boli cardiovasculare [20]. Subiecții obezi metabolici nesănătoși (MUO) au fost definiți prin neîndeplinirea a cel puțin unuia dintre criteriile de mai sus.

Probe de țesut adipos și determinarea dimensiunii adipocitelor

La momentul intervenției chirurgicale bariatrice s-au obținut aproximativ 10-30 g de țesut adipos omental sau 5-10 g de țesut adipos subcutanat abdominal. O bucată din acest țesut a fost fixată imediat în formalină, înainte de montarea parafinei și prepararea lamelor H&E. Țesutul rămas a fost plasat în mediu cald DMEM-F12, suplimentat cu 10% FCS, transportat la laborator și procesat în decurs de 1 oră. Mărimea adipocitelor a fost evaluată prin 2 metode.

Metoda I (n = 35): Fotomicrografiile digitale ale diapozitivelor H&E au fost analizate folosind UTHSCA Image Tool Software (Universitatea din Texas Health Science Center). Doi operatori individuali au calculat diametrul maxim de 100 de adipocite adiacente din fiecare din cele 4 fotografii separate. Aceste date au fost transferate într-un program Excel pentru a calcula diametrul mediu al adipocitelor și deviația standard pentru fiecare probă. Ambii operatori au fost orbi de detaliile clinice ale pacienților.

Metoda II (n = 10): Probele proaspete de țesut adipos au fost incubate în colagenază și mediu DMEM-F12 (1 mg/ml colagenază tip II (Sigma C-6885)) timp de 60 de minute într-un agitator metabolic (60-80 lovituri/min) la 37 ° C. Suspensia celulară a fost filtrată printr-o plasă Nitex de 250 Nm și spălată de 3 ori în mediu cald - celulele au fost lăsate să plutească prin gravitație și infranatul a fost îndepărtat folosind o seringă și un ac de 18 g, înainte de a adăuga mediu proaspăt, inversând ușor recipientul de fiecare dată pentru a asigura o suspendare uniformă. O alicotă de 50 uL a fracției celulare (suspendată în mediu) a fost diluată cu 100 (L mediu și 50 (L albastru tripan (0,4% în H2O)). Zece µL din această soluție au fost transferați într-o cameră Neubauer, s-au făcut fotografii digitale și s-au făcut măsurători ale diametrului mediu al adipocitelor calculat ca mai sus.