Efect anti-obezitate la șoareci obezi C57BL6 induși în diete cu conținut ridicat de grăsimi Studiul unui nou extract din

  • Journal Home
  • Problemă actuală
  • Numărul următor
  • Cele mai citite
  • Cele mai citate (dimensiuni)
    • Ultimii doi ani
    • Total
  • Cele mai citate (CrossRef)
    • Anul trecut 0
    • Total
  • Rețele sociale
    • Luna trecuta
    • Anul trecut
    • Total
  • Arhiva
  • informație
  • Trimiterea online
  • Informații pentru autori
  • Editarea limbii
  • Informații pentru recenzori
  • Politici editoriale
  • Bord editorial
  • Obiective și domeniu de aplicare
  • Abstractizare și indexare
  • Informații bibliografice
  • Informații pentru bibliotecari
  • Informații pentru agenții de publicitate
  • Reimprimări și permisiuni
  • Contactați editorul
  • Informatii generale
  • Despre Spandidos
  • Conferințe
  • Oportunități de muncă
  • a lua legatura
  • Termeni si conditii
  • Autori:
    • Roma mea Lee
    • Yi Eun Kim
    • Jun Young Choi
    • Parcul Jin Ju
    • Hye Ryeong Kim
    • Bo Ram Song
    • Tânărul Whan Choi
    • Kyung Mi Kim
    • Cântec Hyunkeun
    • Dae Youn Hwang

  • Acest articol este menționat în:

    Abstract

    Introducere

    Pe baza rapoartelor anterioare, am emis ipoteza că EMfC induce efectele sale anti-obezitate prin reglarea metabolismului lipidelor. Prin urmare, am folosit șoareci cu obezitate indusă de dietă bogată în grăsimi pentru a evalua modificările acumulării de grăsimi și a profilurilor lipidice, precum și pentru a examina mecanismele de bază ale adipogenezei, lipogenezei și lipolizei.

    obezi

    Materiale și metode

    Pregătirea CEM

    Unul dintre autori (profesorul Young Whan Choi) a caracterizat eșantioanele de frunze de dud colectate din plantațiile din districtul Sangju din Coreea în octombrie 2015. Exemplarele de voucher (nr. De acces Mul-PDRL-1) au fost depuse în ierbarul din Pusan Universitatea Națională (Miryang, Coreea). Profesorul Sang Mong Lee de la Departamentul de Științe ale Vieții și Biochimie a Mediului, Universitatea Națională Pusan, a furnizat cu amabilitate C. militaris utilizat pentru fermentare. Federațiile Cooperative Agricole Jeongeup pentru Agricultura Viermilor de Mătase (Jeongeup, Coreea) au furnizat pulberea de pupă de vierme de mătase.

    Proiectarea experimentului pe animale

    Șoareci masculi C57BL/6 de opt săptămâni au fost achiziționați de la Samtako Bio-Korea Inc. (Osan, Coreea), și a oferit acces ad libitum la apă și o dietă standard iradiată de chow (Samtako Bio-Korea Inc.). În timpul experimentului, șoarecii au fost menținuți într-o stare liberă de agenți patogeni în cadrul unui ciclu de lumină strict (luminile aprinse la 08:00 h și oprite la 20:00 h) la 23 ± 2 ° C și 50 ± 10% umiditate relativă. Toți șoarecii C57BL/6 au fost manipulați la Universitatea Națională Pusan-Laboratory Animal Resources Center, acreditat de Korea Food and Drug Administration (FDA; Unitatea acreditată nr. 000231) și AAALAC International (Unitatea acreditată nr. 001525).

    Comitetul de etică animală al Universității Naționale Pusan ​​(PNU-2017-1519) a aprobat protocolul pentru studiul pe animale. Toate animalele au fost aclimatizate pe o dietă normală (D12450K; Research Diets, New Brunswick, NJ, SUA) timp de 1 săptămână. Șoarecii C57BL/6 au fost apoi împărțiți în 4 grupuri de studiu (7 șoareci/grup): (1) Grupul de control alimentat cu o dietă normală (fără grup de tratament), (2) grupul hrănit cu HFD (dietă bogată în grăsimi) plus vehicul + 1% DMSO) (HFD + grup tratat cu vehicul), (3) grup alimentat HFD plus 10 mg/kg Orlistat (Sigma-Aldrich Co.) (grup tratat HFD + OT) și (4) grup alimentat HFD plus 50 mg/kg EMfC (Grup tratat cu HFD + EMfC). Timp de 12 săptămâni, șoarecii din toate grupurile de tratament HFD au consumat HFD conținând 60% kcal de grăsime achiziționată de la Research Diets (nr. Cat. D12492; Research Diets, Inc., New Brunswick, SUA). După 24 de ore de la tratamentul EMfC final, toți șoarecii au fost eutanasiați folosind CO 2 gaz, după care probele de țesut au fost achiziționate și depozitate în tuburile Eppendorf la -70 ° C până la testare.

    Măsurarea greutății corporale, a aportului alimentar și a greutății organelor

    De-a lungul perioadei experimentale, greutatea corporală a șoarecilor tratați cu Vehicle, OT sau EMfC a fost măsurată zilnic la ora 10:00 folosind o balanță electronică (nr. Cat. AD-2.5; Mettler Toledo, Greifensee, Elveția) conform ghidurilor KFDA . În plus, greutățile ficatului și ale organelor abdominale colectate de la șoarecii sacrificați C57BL/6 au fost determinate folosind aceeași metodă utilizată pentru a măsura greutatea corporală. Aportul de furaje a fost măsurat în același timp o dată pe săptămână în timpul perioadei de studiu, utilizând un bilanț chimic (Mettler Toledo, Elveția).

    Analiza biochimică serică

    După 12 săptămâni de hrănire a dietelor experimentale, sângele a fost colectat din venele abdominale ale tuturor șoarecilor C57BL/6 după post timp de 18 ore. Probele de sânge au fost incubate timp de 30 de minute la temperatura camerei în tuburi de separare a serului (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, SUA). Serul a fost obținut prin centrifugare la 1.500 × g timp de 15 min. Glucoza serică, TC (colesterol total), TG (trigliceridă), colesterolul cu lipoproteine ​​cu densitate înaltă (HDL) și nivelurile colesterolului cu lipoproteine ​​cu densitate mică (LDL) au fost analizate de analizorul chimic automat (BS-120 Chemistry Analyzer; Mindray, Shenzhen China). În plus, serul a fost analizat pentru identificarea fosfatazei alcaline (ALP), a alaninei aminotransferazei (ALT), a aspartatului aminotransferazei (AST), a azotului ureic din sânge (BUN) și a creatininei (Crea) utilizând un analizor biochimic automat (BS-120; Mindray) . Toate testele au fost efectuate în duplicat folosind ser proaspăt.

    Analiza histopatologică

    Țesuturile de ficat și grăsime disecate de la șoareci din toate grupurile de subgrupuri au fost fixate în formaldehidă tamponată neutră 10% (pH 6,8) peste noapte. Țesutul hepatic deshidratat a fost apoi încorporat în parafină. Apoi, o serie de secțiuni de ficat și grăsime (4 μm) au fost tăiate din țesuturile încorporate în parafină folosind un microtom Leica (nr. Cat. DM500; Leica Microsystems, Bannockburn, IL, SUA). Aceste secțiuni au fost apoi deparafinate cu xilen (nr. Cod 8587-4410; Daejung, Gyeonggi-do, Coreea), rehidratate cu etanol gradat (concentrații în scădere de 100-70%) și în cele din urmă spălate cu apă distilată. Diapozitivele cu secțiuni hepatice au fost colorate cu hematoxilină (nr. Cat. MHS16) și eozină (nr. Cod HT110332; ambele Sigma-Aldrich Co.), spălate cu dH20 și modificările patologice au fost evaluate folosind Suita de aplicații Leica ( Leica Microsystems).

    Analiza reacției în lanț a transcripției cantitative a polimerazei (RT-qPCR)
    Analiza Western blot
    Analiza semnificației statistice

    figura 1.

    Figura 2.

    Figura 3.

    Figura 4.

    Figura 5.

    Exprimarea proteinelor asociate lipolizei în țesuturile hepatice. (A) Analiza Western blot a măsurat fosforilarea sau expresia mai multor proteine ​​asociate lipolizei, incluzând (B) perilipina, p-perilipina, HSL, p-HSL și ATGL. Intensitatea fiecărei benzi a fost determinată folosind un densitometru imagistic, iar nivelurile relative ale celor patru proteine ​​au fost calculate pe baza intensității actinei. Cinci până la șase șobolani per grup au fost analizați în triplicat prin Western Blot. Datele sunt prezentate ca medie ± deviația standard a trei replici. * P 1

    Haslam DW și James WP: Obezitate. Lancet. 366: 1197–1209. 2005. Vezi articolul: Google Scholar: PubMed/NCBI