Decoctul modificat de Pulsatilla atenuează colita indusă de oxazolonă la șoareci prin suprimarea

  • Journal Home
  • Problemă actuală
  • Numărul următor
  • Cele mai citite
  • Cele mai citate (dimensiuni)
    • Ultimii doi ani
    • Total
  • Cele mai citate (CrossRef)
    • Anul trecut 0
    • Total
  • Rețele sociale
    • Luna trecuta
    • Anul trecut
    • Total
  • Arhiva
  • informație
  • Trimiterea online
  • Informații pentru autori
  • Editarea limbii
  • Informații pentru recenzori
  • Politici editoriale
  • Bord editorial
  • Obiective și domeniu de aplicare
  • Abstractizare și indexare
  • Informații bibliografice
  • Informații pentru bibliotecari
  • Informații pentru agenții de publicitate
  • Reimprimări și permisiuni
  • Contactați editorul
  • Informatii generale
  • Despre Spandidos
  • Conferințe
  • Oportunități de muncă
  • a lua legatura
  • Termeni si conditii
  • Autori:
    • Xuewei Wang
    • Fugang Fan
    • Qin Cao

  • Acest articol este menționat în:

    Abstract

    Introducere

    Bolile inflamatorii intestinale (IBD) sunt tulburări inflamatorii gastrointestinale (GI) idiopatice, care constau din boala Crohn (CD) și colita ulcerativă (UC). În prezent se acceptă faptul că modificările microbiotei intestinale, susceptibilitatea genetică, disfuncția reglării imunologice și defectele barierei intestinale sunt implicate în etiopatogeneza IBD (1,2). În general, UC este limitat doar la colon, în timp ce CD poate afecta întregul tract GI. Durerea abdominală, pierderea în greutate și diareea sângeroasă sunt cele mai frecvente simptome ale IBD (3). IBD sunt boli pe tot parcursul vieții, pentru care pacienții necesită adesea tratament farmacologic pe tot parcursul vieții și pot necesita intervenții chirurgicale.

    colita

    Medicamentele convenționale utilizate pentru tratamentul IBD includ corticosteroizi, medicamente imunosupresoare, antibiotice și agenți biologici, inclusiv factorul de necroză antitumorală-α. Cu toate acestea, utilizarea acestor medicamente este eficientă numai pentru ameliorarea simptomatică temporară și este asociată cu complicații grave și efecte secundare toxice (3-5). Astfel, utilizarea medicamentelor complementare și alternative (CAM), inclusiv acupunctura, homeopatia și medicamentele pe bază de plante, pentru tratamentul pacienților cu IBD este în creștere la nivel mondial, iar procentul pacienților cu IBD care utilizează CAM în America de Nord și Europa a fost estimat la până la 70% (6-9). Medicina tradițională chineză (TCM) este una dintre cele mai dezvoltate ramuri ale CAM în lume (10). Mai multe rapoarte științifice și studii clinice au caracterizat eficacitatea preparatelor pe bază de plante în IBD, prezentând rezultate promițătoare și oferind o perspectivă asupra mecanismelor, care depășesc activitatea lor terapeutică (11-14).

    Decoctul modificat de Pulsatilla, conținând șapte plante utilizate în mod obișnuit (Radix Pulsatillae, Cortex Phellodendri, Rhizoma Coptidis, Cortex Fraxini, Sanchi, Radix Paeoniae Rubra și Radix Glycyrrhizae), este formulat utilizând formularea TCM a decoctului de Pulsatilla și adăugând alte trei plante pe bază de plante, Radix Paeoniae Rubra și Radix Glycyrrhizae). Decoctul de Pulsatilla are o varietate de efecte farmacologice, iar ingredientele active din aceste plante pe bază de plante au prezentat efecte hepatice protectoare, antiinflamatoare, antibacteriene, antitumorale și anti-oxidante (15-19). Decoctul modificat de Pulsatilla a fost folosit anterior pentru a trata UC în practica clinică din China, prezentând efecte promițătoare împotriva inflamației și a diareei (20). Deși decoctul modificat de Pulsatilla este o formulă TCM eficientă pentru efectele farmacologice indicate mai sus, rămâne de elucidat posibilul mecanism în tratamentul UC. Astfel, prezentul studiu și-a propus să investigheze eficacitatea terapeutică a decoctului modificat de Pulsatilla împotriva IBD și să elucideze mecanismele moleculare de bază.

    Materiale și metode

    Inducerea colitei
    Pregătirea și administrarea intragastrică a extractelor solubile în apă de decoct modificat de Pulsatilla

    Decoctul modificat de Pulsatilla a constat din Radix Pulsatillae (30 g), Cortex Phellodendri (12 g), Rhizoma Coptidis (5 g), Cortex Fraxini (9 g), Sanchi (3 g), Radix Paeoniae Rubra (12 g) și Radix Glycyrrhizae (6 g). Pentru a obține extracte solubile în apă, la aceste plante din plante s-au adăugat volume de apă de 10 ori mai mari, iar amestecurile rezultate au fost apoi încălzite la 90 ° C timp de 1 oră. Această procedură a fost repetată de trei ori, după care toate lichidele de extracție au fost colectate, uscate și depozitate la 4 ° C.

    Extractele decoctului (10 mg/g greutate corporală) sau SASP (20 mg/g greutate corporală) au fost administrate intragastric șoarecilor de colită indusă de oxazolonă o dată pe zi timp de 7 zile. SASP a acționat ca un control pozitiv. Ca martor negativ, a fost administrat un volum egal de apă la șoarecii de colită indusă de oxazolonă. Grupul PBS a fost administrat șoareci de colită indusă de oxazolonă

    Evaluarea colitei clinice la șoareci

    Cei șaptezeci de colite au fost evaluați utilizând un sistem de notare a indicelui activității bolii (DAI) și pierderea în greutate corporală. Scorul DAI a fost calculat ca suma scorului scaunului sângeros (0, scaun normal colorat; 1, scaun maro; 2. scaun roșiatic; 3, scaun sângeros) și scorul scaunului diareic (0, scaun normal; 1, scaun ușor moale; 2, scaun foarte moale; 3, scaun apos). Modificarea greutății corporale a fiecărui șoarece a fost calculată folosind următoarea formulă: Pierderea în greutate (%) = [(greutatea în ziua 1) - (greutatea în fiecare zi)]/greutatea în ziua 1.

    Examenul histologic al colonului

    După 7 zile, șoarecii au fost sacrificați folosind 0,1 ml de pentobarbital de sodiu 2% și o porțiune de 10 cm din colonul distal a fost îndepărtată de la 4 șoareci din fiecare grupă, spălată cu soluție salină și fixată în 10% formalină tamponată natural. Țesuturile fixe au fost apoi încorporate în parafină (Sigma-Aldrich), tăiate în secțiuni de țesut (5 µm grosime) și colorate cu hematoxilină și eozină (Leica Microsystems, Ltd., Milton Keynes, Marea Britanie) și examinate cu un microscop (Leica Microsystems, Ltd.) și evaluat calitativ cu software-ul Leica QWin 3.1 utilizând următorii parametri: Infiltrarea transmurală a celulelor mononucleare, îngroșarea peretelui colonului, hiperplazia mucoasei, eroziuni, epuizarea celulelor calice și distorsiunea arhitecturală a criptelor.

    Analiza reacției în lanț a transcripției cantitative a polimerazei (RT-qPCR)
    ELISA

    Nivelurile de proteine ​​ale IL-5 și IL-13 în supernatanții lizatului țesutului colonului au fost măsurate folosind kitul ELISA Quantikine Mouse IL-13 și kitul ELISA Quantikine Mouse IL-5 (R&D Systems, Minneapolis, MN, SUA), conform protocolul producătorului. Toate probele au fost analizate în duplicat și normalizate la conținutul total de proteine ​​ale probei, exprimat ca proteină pg/mg.

    Analiza Western blot
    Analiza datelor

    figura 1

    Figura 2