Compoziția polifenolică a Cistus incanus L, Trachystemon orientalis L
Vanya Dimcheva *, Nikolay Kaloyanov și Maria Karsheva
Informații despre autor și articol
Citați acest lucru ca
Dimcheva V, Kaloyanov N, Karsheva M (2019) Compoziția polifenolică a perfuziilor Cistus incanus L., Trachystemon orientalis L. și Melissa officinalis L. prin metoda HPLC-DAD. Open J Anal Bioanal Chem 3 (1): 031-038. DOI: 10.17352/ojabc.000008
Abstract
Textul articolului principal
Introducere
Interesul cercetării față de compușii activi, în special polifenolii, ai unei surse naturale a crescut mult în ultimii ani [1]. Plantele care conțin antioxidanți naturali sunt utilizate ca o sursă importantă de noi formulări medicamentoase, iar extractele de plante au fost utilizate pentru tratarea multor boli, iar modul lor de acțiune s-ar fi putut baza pe conținutul de compus fenolic [2,3]. Compușii fenolici sunt grupurile cele mai răspândite de fitochimicale și au o importanță fiziologică și morfologică considerabilă la plante, precum și au puternice proprietăți antioxidante [4].
Trachystemon orientalis L. este cunoscut sub denumirea de „Abraham-Isaac-Jacob“ sau „Orient Borage“ în Turcia. Planta medicinală este comestibilă și toate părțile acesteia sunt consumate ca legume în Istanbul și în diferite părți ale Mării Negre [11,12]. Constituenții fitochimici sunt compuși fenolici, taninuri, uleiuri esențiale, mucilagii, saponine, nitrați și rășini, printre altele. Utilizările folclorice înregistrate de Trachystemon orientalis sunt ca diuretic, purificator de sânge, emolient, antipiretic etc. [13]. În Bulgaria, „Eastern Lopuh“ (denumirea locală Strandja) nu este populară și este folosită ca hrană doar din populația locuită unde este distribuită - Balcanii Centrali de Est și toată Strandja.
Prin urmare, identificarea și cuantificarea fenolilor din diferite surse devine din ce în ce mai importantă datorită potențialei lor aplicații pentru tratarea bolilor. O metodă foarte comună utilizată pentru analizele calitative și cantitative ale polifenolilor este HPLC cuplat cu DAD. HPLC este o tehnică puternică pentru analiza rapidă a constituenților bioactivi, deoarece permite profilarea sistematică a probelor complexe de plante și se concentrează în mod specific pe identificarea lor și evaluarea consecventă a compușilor identificați. Spectrele UV/Vis au fost utilizate de mult timp pentru analiza structurală a polifenolilor și flavonoidelor [19].
Scopul studiului de față a fost identificarea și cuantificarea compușilor fenolici ai extractelor de apă (infuzii) din frunzele de Cistus incanus, semințele acoperite cu duritate Cistus incanus, Trachystemon orientalis și frunzele și tulpinile Melissa officinalis utilizând metoda HPLC-DAD dezvoltată și validată anterior.
Se știe că activitățile extraselor brute obținute din plante medicinale pot fi supuse modificărilor pe baza variațiilor compoziției chimice. De asemenea, diferența de activități se poate datora originii geografice, localității, condițiilor climatice și timpului de recoltare a materialului vegetal colectat [20,21]. Prin urmare, este interesant să descoperiți profilurile polifenolice ale plantelor colectate în diferite anotimpuri și plante cu origine geografică diferită.
Scopul acestei investigații a fost, de asemenea, să fie comparate profilurile polifenolice ale frunzelor de Cistus incanus colectate vara și colectate în anotimpurile recoltei de iarnă și ale frunzelor Cistus incanus colectate din Bulgaria și Grecia. Cu toate acestea, este un aspect interesant de investigat infuzia 'constituenților polifenoli ai speciilor endemice nedescoperite cultivate în Bulgaria - Cistus incanus și Trachystemon orientalis. Cu toate acestea, este interesant să se efectueze fără studii înainte de melisa cultivată în grădină (Melissa officinalis) originară din nord-estul Bulgariei.
În ansamblu și datorită proprietăților potențiale legate de sănătate ale perfuziilor de plante, scopul acestei lucrări a fost de a oferi noi cunoștințe cu privire la conținutul substanțelor antioxidante ale ierburilor selectate.
Materiale și metode
Materiale
Analiza HPLC
Analizele au fost efectuate cu un sistem HPLC Agilent 1100 (Agilent 1100 HPLC, Agilent Technologies, California, SUA) echipat cu un detector DAD (G1315B, Agilent Technologies, California, SUA) și gestionat de HP Chemstation. Coloana utilizată a fost Purospher star, Hiber RT 125-4; RP18 (stea Purospher, Merck, Bulgaria). Temperatura coloanei a fost de 25 ° C. Separarea a fost efectuată utilizând un gradient liniar folosind 0,1% TCA (A) și 100% acetonitril (B). Gradientul a început cu 5% B, 15% B la 16,5 min, 33% B la 22,5 min, 100% B la 30,5 min, 5% B la 35 min până la 40 pentru reechilibrare. Debitul a fost de 1,6 ml/min. Volumul de injecție pentru probe și standarde a fost de 30 μL. Achiziția DAD a fost stabilită în intervalul 200-400 nm. Identificarea compușilor principali a fost efectuată prin compararea timpilor de retenție și a spectrelor UV ale vârfurilor obținute atât în probă, cât și în cromatogramele standard.
Pregătirea perfuziilor
Toate probele au fost păstrate într-un loc uscat timp de doi ani înainte de a fi măcinate în râșniță și cernute. Frunzele și semințele au fost folosite conținând apă, nu mai mult de 10%. Pentru experimente, a fost utilizată o fracțiune de dimensiunea particulelor de 0,5-1,0 mm. Extracțiile au fost preparate cu ajutorul tehnicii de perfuzie. Raportul solid-solvent a fost fixat la 1:30 (1 g frunze/semințe în 30 ml solvent) pentru toate probele. Infuziile au fost efectuate cu apă deionizată timp de 15 minute. Infuziile au fost lăsate să rămână la temperatura camerei, fără o poziție suplimentară. După fiecare extracție, materialul vegetal epuizat a fost presat cu atenție, iar extractul a fost filtrat prin bumbac, hârtie de filtru și după aceea s-a folosit un filtru de seringă cu membrană de nylon de 0,45 μm (Acrodisc, Sigma-Aldrich, Bulgaria). Probele filtrate au fost introduse în flacoanele de 2 ml și depozitate în frigider înainte de examinare.