Articolul complet Modelarea infecțiilor cu Aspergillus fumigatus la porumbeii de curse (Columba livia domestica)

ARTICOLE ORIGINALE

Articol complet
Cifre și date
Referințe
Citații
Valori
Reimprimări și permisiuni
PDF

Abstract

Introducere

Aspergiloza aviară este o boală infecțioasă și necontagioasă cauzată de Aspergillus spp. Aceste ciuperci sunt omniprezente și pot fi izolate de sol, aer și vegetație. Cea mai frecvent izolată specie este Aspergillus fumigatus dar altele Aspergillus spp., inclusiv Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Aspergillus glaucus și Aspergillus nidulans, poate juca, de asemenea, un rol (Okoye & Okeke, 1986; Barton și colab., 1992; Perelman & Kuttin, 1992; de Wit și colab., 1993; Oglesbee, 1997; Joseph, 2000). Ocazional apar infecții mixte (Perelman și Kuttin, 1992).

A. fumigatus este un agent patogen oportunist, cauzând infecții clinice la o presiune crescută a infecției sau la gazdele imunosupresate. Celulele fagocitare și mecanismele de eliminare microbiană respiratorie normale sunt apărarea de primă linie împotriva sporilor inhalați. Boala apare atunci când acest mecanism defensiv intrapulmonar devine inadecvat și nu reușește să elimine organismul (Oglesbee, 1997).

Materiale și metode

Animale

În primul experiment, 18 porumbei de curse adulți sănătoși din punct de vedere clinic (Columba livia domestica) au fost împărțite în trei grupe de șase porumbei. În cel de-al doilea experiment, 35 de porumbei cu porumbei sănătoși din punct de vedere clinic, de 4 săptămâni până la 5 săptămâni au fost împărțiți în șapte grupe de patru porumbei și un grup de șapte porumbei. Animalele erau libere de Salmonella spp. și endoparaziți. În timpul experimentului, fiecare pasăre a fost adăpostită individual la 20-22 ° C și 31% până la 55% umiditate relativă cu o fotoperioadă de 12 ore. Păsările au primit o dietă comercială cu porumbei ad libitum și avea acces gratuit la apă potabilă proaspătă.

Toate experimentele au fost efectuate cu permisiunea Comitetului Etic al Facultății de Medicină Veterinară, Merelbeke, Universitatea din Gent, Belgia (CE 2006/099).

Inocul experimental

A. fumigatus tulpina utilizată în acest studiu a fost izolată dintr-un porumbel de curse, care pierdea în greutate timp de 4 săptămâni și a prezentat dispnee severă. Culturile vechi de cinci zile ale acestei tulpini pe Sabouraud dextroză agar (CM0041; Oxoid Ltd, Basingstoke, Marea Britanie) au fost spălate cu 5 ml de 0,01% Tween 80 în soluția de sare echilibrată a Hank (HBSS) pentru recoltare A. fumigatus conidia. Conidiile au fost spălate de trei ori în 0,01% Tween 80 în HBSS (3200 x g, 10 min la 4 ° C) și suspensia a fost ajustată la o concentrație de 10 6 sau 10 8 A. fumigatus conidii/ml în HBSS prin număr de hemacitometre.

Proiectare experimentală

Primul experiment a fost efectuat pentru a determina o doză adecvată de infecție. Trei grupe de șase porumbei au fost inoculate intratraheal, fie cu 0,2 ml de 10 6 sau 10 8 A. fumigatus conidia/ml suspensie în HBSS sau cu 0,2 ml HBSS. Al doilea experiment a fost efectuat pentru a examina impactul utilizării diferitelor căi de inoculare și imunosupresie asupra evoluției unei infecții cu A. fumigatus. Șapte grupuri de patru porumbei au fost inoculate fie cu 0,2 ml de 10 8 A. fumigatus conidia/ml suspensie în HBSS (grupe 4, 5, 6, 7 și 8) sau cu 0,2 ml HBSS (grupuri de control 1 și 2) utilizând una dintre următoarele căi de inoculare: intratraheală (grupa 8), inoculare în aerul toracic drept sac (grupurile 1, 4 și 6) și inoculare în partea apicală a plămânului drept (grupurile 2, 5 și 7). Porumbeii din trei grupuri au primit trei injecții cu dexametazonă (2 mg/kg intramuscular la fiecare 48 de ore) înainte de inoculare cu A. fumigatus (Grupurile 6, 7 și 8). Un grup de porumbei (= 7) au primit doar trei injecții cu dexametazonă (grupul de control 3).

Animalele au fost observate cel puțin de două ori pe zi. Prezența unor pene ciufulite, dispnee, strănut și stridor au fost marcate orbește. Din considerente etice, porumbeii cu dispnee severă (respirație cu cioc deschis) sau slăbiciune extremă au fost eutanasiați. Acest lucru a fost notat ca „mortalitate”. În primul experiment la 22 de zile după inoculare (p.i.) și în al doilea experiment la 7 zile p.i., toți porumbeii rămași au fost eutanasiați printr-o injecție intravenoasă de 0,2 ml T61 (Intervet, Mechelen, Belgia) în vena bazilicii. La necropsie, au fost descrise leziuni macroscopice și s-au recoltat probe pentru examen micologic și bacteriologic.

Greutate

Toți porumbeii au fost cântăriți în momentul primei injecții cu dexametazonă, în momentul inoculării și la necropsie. Analiza statistică a fost efectuată folosind un eșantion de două t test (Microsoft Office Excel).

Scorul clinic

În fiecare zi, fiecărui porumbel i s-a acordat un scor pentru sărituri la coadă și respirație abdominală. Aceste scoruri au variat de la 0 la 1 (0 = absent, 0,2 = abia vizibil, 0,4 = ușor, 0,6 = moderat, 0,8 = pronunțat, 1 = foarte pronunțat). Suma celor două scoruri formează scorul dispneei pentru un anumit porumbel într-o anumită zi. Prezența sau absența penelor ciufulite, ca semn general al bolii, a fost, de asemenea, observată zilnic pentru fiecare porumbel.